ANO1稳定转染细胞模型的构建及生理特性

来源 :中国兽医杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fibiya
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
为了构建稳定转染钙激活氯离子通道(CaCCs)细胞模型并研究其生理特性,本试验采用脂质体转染和抗生素筛选获取共表达阴离子通道1(ANO1)蛋白和黄色荧光蛋白双突变体(YFP-H148Q/I152L)的Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞;用倒置荧光显微镜观察ANO1和YFP-H148Q/I152L在FRT细胞的表达情况;用流式细胞仪检测细胞模型纯度;用荧光淬灭动力学试验检测细胞模型功能;用细胞模型或膜片钳技术研究ANO1生理特性,包括转运阴离子的特性、不同激活剂及抑制剂对ANO1的调控作用、ANO1电流受Ca2+调控作用等.结果 显示,倒置荧光显微镜下可观察到清晰的荧光信号;荧光淬灭动力学试验证明,此细胞模型可用于ANO1生理特性的研究;ANO1具有转运阴离子的特性;钙激活氯离子通道激活剂可以使ANO1开放且呈剂量依赖关系;钙激活氯离子通道抑制剂可抑制ANO1开放且具有剂量依赖关系;ANO1电流呈现钙依赖的特性;高浓度Ca2+引起Run-down现象.结果 表明,本试验成功构建ANO1细胞模型,ANO1具有经典的钙激活氯离子通道的生理特性.
其他文献
随着多重耐药病原体的出现和传播,细菌耐药性对全球医疗保健构成日益严重威胁.细菌间基因的水平转移与重组加速了抗性基因的传播,特别是Bacterial conjugation.然而,翻译过程中常存在将Conjugation翻译为“结合”或“接合”的争议,导致在教材和文献中常常存在二者混用、误用的情况.生物学科的专业性极强,其英文翻译要精准,遣词用句都应该秉持科学、严谨的原则.因此,在辨析了字源、词义,分析Conjugation涉及的相关概念及生物过程的基础上,结合国内主流教材和文献中Conjugation翻译
1只幼狼在嬉戏过程中后半部分躯体遭到挤压,左后肢跛行,无法触地.经影像学检查、实验室检查并结合临床检查,诊断为股骨头骨折.为帮助患狼消除异常疼痛,从患狼左侧股三角区打开手术通路并切除股骨头骨折部分.术后患狼无疼痛感,能够正常行走,预后良好.对于股骨头骨折的治疗,及时采取股骨头切除术,有利于降低并发症的发生率以及缓解动物机体的疼痛感.
1 病例介绍rn海豚4#,雌性,2005年7月从日本引进,完成检疫后在饲养,2017年7月21日出现精神不振,呼吸加快,呼吸孔酸臭,食欲减退,体温高达38.2℃,离群等情况.rn2诊断与治疗rn发病初期动物精神不振,呼吸加快,未摄食,多数时间在池底部游动,下午进行池体排水注射治疗,体温38.2℃,墨绿色粪便,便检有真菌,呼吸孔酸臭,尿液颜色正常,便检白细胞1~3个,偶见脂肪球,怀疑胃部有异常菌群感染.血检白细胞达26.39×109/L(参考区间:5×109/L~9×109/L)(表1),中性粒细胞百分比达
期刊
“培养什么样的人、如何培养人、为谁培养人”和“办什么样的大学、怎样办好大学”是中国高等教育必需回答的2个根本性问题[1].2018年5月2日,习近平总书记在与北京大学师生座谈时提出“我们的教育要培养德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人”[2].为了实现这一人才培养目标,高校必须坚持把“立德树人”作为中心环节,着力构建全员、全过程、全方位“三全育人”模式.在构建“三全育人”大格局的过程中,课程思政发挥着重要的作用.“课程思政”一词是对“培养什么样的人、如何培养人、为谁培养人”根本问题的回答,更是对“立
期刊
为了确定导致豫西地区某养殖户饲养的生猪发病而死亡的原因.本试验通过采集病死猪的肺脏、肾脏、肠道等组织,经过细菌的分离培养,形态观察,生化鉴定,16S rDNA扩增并测序、同源性比对方法,确定分离菌株为大肠杆菌,且与已报道的大肠杆菌(ATCC 11775)同源性达到99.36%.通过大肠杆菌的stx2毒力基因引物进行了PCR扩增、测序分析及小鼠攻毒试验,最终确定引起该养殖户生猪发病的病因为出血性大肠杆菌,且致病性较强.通过选择临床常用的10种抗菌药物对分离菌进行药敏试验,发现该菌对不同药物呈现出不同的敏感性
为了解替米考星肠溶颗粒混饲给药在猪体内的残留消除和组织分布,为制定休药期提供依据,本试验用高效液相色谱(HPLC)对猪可食性组织中替米考星残留进行测定.结果 显示,HPLC在猪的脂肪、肌肉、肝脏和肾脏中对替米考星的检测限(LOD)和定量限(LOQ)均分别为0.025 μg/g和0.050μg/g.当空白肌肉和脂肪组织中替米考星添加浓度为0.05、0.1 μg/g和1μg/g,肝脏和肾脏组织中替米考星添加浓度为0.05、0.5μg/g和5μg/g时,平均回收率均达到80%以上,批间和批内变异系数均小于5%.
仔母猪“小挑花”术是基层兽医常操作的一个技术性很强的手术,也是畜牧兽医专业必修课程《动物外科手术》中的一个教学单元.本文从教学目标、教学改革实施、软件内涵、教学效果等方面阐述了如何将仔母猪“小挑花”术仿真实训软件应用于实训教学的全过程.该软件将动画技术与“小挑花”术有机结合,以操作过程与所用器械的选择为主线,同时配有教学动画,体现了教学性、趣味性及实用性,可作为仔母猪“小挑花”术实践教学的辅助手段和学生自学的工具.
2018年6月17日,南京红山森林动物园兽医院接诊黄颊长臂猿左前肢桡尺骨远端闭合性骨折的病例,经麻醉后为其行接骨板内固定治疗.在术后治疗保定过程中,黄颊长臂猿在压缩笼内剧烈挣扎致其肱骨骨折,对其行接骨板、环扎钢丝加髓内针治疗,数个疗程后肱骨骨折部位未能愈合,在应用外固定支架治疗后方取得成功,现将该病例手术过程及术后情况介绍如下.
期刊
水是病毒传播的最重要途径之一,但是从水中检测病毒是一项挑战.由于水中的病毒滴度低,而且水的样品成分复杂,检测前通常需要进行水样品处理,浓缩水中的病毒以达到可检测的数量.本试验分析切向流超滤技术的关键参数(包括切向流的不同孔径、不同面积的超滤柱)以提高从水环境样品中浓缩对虾白斑综合症病毒的效率,并用荧光PCR和数字PCR来定量检测病毒浓缩效果.结果 显示,浓缩白斑综合症病毒的过滤最佳过滤柱为0.2 μm微过滤膜、UFP-100-C-4MA超滤柱(孔径100 kDa,面积为420 cm2).在进行水样品倍比稀
为养殖场选择消毒剂防控布鲁氏菌病(简称“布病”)提供参考,本研究分别检测4种常用消毒剂(戊二醛癸甲溴铵、二氯异氰尿酸钠、复合酚和过硫酸氢钾复合粉)的10种不同浓度相应的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),以比较其对3种布鲁氏菌(羊种、犬种和猪种布鲁氏菌)的消毒效果.结果 显示,对羊种、犬种和猪种布鲁氏菌,戊二醛癸甲溴铵的MIC分别为3.91、7.81 mg/L和15.63 mg/L;二氯异氰尿酸钠的MIC分别为62.50、125.00 mg/L和250.00 mg/L;复合酚的MIC分别为17