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[目的]构建汉坦病毒S片段标准品，用于实时荧光定量PCR检测汉坦病毒。[方法]对S片段基因进行序列分析，利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针，提取病人总RNA，逆转录为cDNA，经PCR扩增，产物纯化后与PMD18-TVector连接，转化到大肠杆菌DH5α，筛选得到标准品的质粒，提取质粒并进行定量。[结果]重组S片段基因质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长，表明基因已成功克隆。以不同稀释水平的标准品进行扩增，统计学分析显示α值与标准品浓度的对数存在良好线性关系，回归系数在0．99以上。