【摘 要】
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目的 探讨骨髓、脾脏和淋巴结来源间质干细胞(MSC)免疫调节能力的差异,筛选更适合治疗免疫相关疾病的MSC来源.方法 分离同一供者来源的脾脏、骨髓、淋巴结的MSC,利用诱导分化
【机 构】
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中山大学附属第三医院生物治疗中心,广东广州510630;中山大学干细胞与组织工程研究中心,广东广州510080;中山大学干细胞与组织工程研究中心,广东广州,510080
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目的 探讨骨髓、脾脏和淋巴结来源间质干细胞(MSC)免疫调节能力的差异,筛选更适合治疗免疫相关疾病的MSC来源.方法 分离同一供者来源的脾脏、骨髓、淋巴结的MSC,利用诱导分化体系验证其成骨成脂成软骨分化潜能,通过流式细胞术检测表面标记物;同时构建MSC与T细胞共培养体系,并检测MSC的免疫调节能力.结果 成功分离并培养了骨髓、脾脏和淋巴结来源的MSC,3种MSC均为成纤维样细胞形态,贴壁生长,流式检测发现3种MSC均高表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166(均＞98％),不表达CD34、CD45(均＜1％);在体外特定诱导条件下3种MSC均具有成骨成脂成软骨分化潜能.通过与T淋巴细胞共培养实验发现脾脏来源的MSC (SP-MSC)、淋巴结来源的MSC(LN-MSC)及骨髓来源的MSC(BM-MSC)均能有效抑制T细胞增殖,CD4+T细胞增殖的比例分别为:单独T细胞:(53.69±2.96)％,BM-MSC:(35.62±2.61)％,SP-MSC:(23.54±2.35)％,LN-MSC:(2.92±0.35)％,也能抑制T细胞分泌炎性因子,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平分别下降为:单独T细胞:(57.57±1.71)％,BM-MSC:(22.88±1.37)％,SP-MSC:(14.85±1.37)％,LN-MSC:(12.67±1.37)％;干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平分别下降为:单独T细胞:(15.42±1.09)％,BM-MSC:(9.49±0.28)％,SP-MSC:(2.59±0.28)％,LN-MSC:(2.05±0.28)％,且SP-MSC和LN-MSC的抑制效果均优于BM-MSC.结论 成功分离脾脏、淋巴结、骨髓的MSC,且脾脏、淋巴结来源的MSC的免疫调节能力优于骨髓来源的MSC,有望为免疫相关疾病的治疗提供更合适的MSC.
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