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目的利用细胞内重组技术构建大容量人乳腺癌单链抗体（scFv）库。方法收集30例乳腺癌外周转移淋巴结，依次提取总RNA、mRNA，RT—PCR扩增全套可变区基因（VL、VH），各自克隆到T载体，构建T载体库。然后从T载体上酶切VL、VH分步克隆到噬粒载体pDAN5，经电转化TG1得到初级库。辅助性噬菌体感染初级库，使噬菌体抗体表面呈现。提纯噬菌体抗体，滴定浓度后感染大肠杆菌BS1365进行细胞内重组。噬菌体挽救后再次提纯滴定噬菌体，感染大肠杆菌DH5ctF．得到次级库，并测序验证。结果VH、VLT载体库分别