人骨保护素-分枝杆菌热休克蛋白70融合蛋白的克隆与表达及其活性鉴定

来源 :中国组织工程研究与临床康复 | 被引量 : 0次 | 上传用户：myd1977

【摘要】

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目的：为解决类风湿性关节炎中骨破坏及炎症损伤两大难题，拟克隆入骨保护素功能区与分枝杆菌热休克蛋白70肽段融合基因，进一步观察其在大肠杆菌中的表达并鉴定活性。方法：实验于20

【作者】

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马静王炜赵文明李慎涛曾牧刘振龙

【机构】

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首都医科大学免疫学系

【出处】

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中国组织工程研究与临床康复

【发表日期】

：

2008年15期

【关键词】

：

在E.coli.BL21(DE3)中表达了骨保护素-热休克蛋白70融合蛋白体外功能实验证实该融合蛋白具有一定的生物学活性.

【基金项目】

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北京市优秀人才培养资助项止（20061D0501800258）,北京市教委科技发展计划项目资助（KM2008100250131）

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目的：为解决类风湿性关节炎中骨破坏及炎症损伤两大难题，拟克隆入骨保护素功能区与分枝杆菌热休克蛋白70肽段融合基因，进一步观察其在大肠杆菌中的表达并鉴定活性。方法：实验于2006-05/2007-09在首都医科大学免疫学系实验室完成。采用反转录-聚合酶链反应技术从入骨肉瘤细胞系MG63总RNA中扩增骨保护素成熟肽段编码区基因，构建pGEM-TEasy-骨保护素重组质粒。以此为模板，聚合酶链反应扩增骨保护素-热休克蛋白70功能区DNA，构建重组表达载体pET-28a-骨保护素-热休克蛋白70，将其转化E.co

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