携EGFP的STAT3载体构建、表达及其对HEP-2细胞的增殖抑制作用

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目的构建携EGFP的信号转导与转录激活因子(STAT)3 mRNA的小RNA干扰(siRNA)表达载体,并检测STAT3表达及其对HEP-2细胞增殖的抑制作用。方法合成用于产生针对STAT3的小发卡状RNA(shRNA)寡核苷酸,克隆到PGPU6/EGFP/Neo载体中,BbsⅠ和BamH Ⅰ双酶切及测序鉴定重组体,并转染HEP-2细胞。流式细胞仪、RT—PCR、免疫印迹、MTT法检测HEP-2细胞中STAT3的表达及该细胞的增殖情况。结果成功构建STAT3-siRNA表达载体,转染HEP-2后可显著抑制
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