人T细胞受体ζ链基因在昆虫细胞中的表达

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目的:克隆人T细胞受体(TCR)ζ链基因,运用昆虫杆状病毒系统表达该蛋白.方法:用RT-PCR从人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆TCRζ链cDNA,构建到昆虫杆状病毒系统专用的Transfer载体中,并与杆状病毒共转染昆虫sf9细胞.用SDS-PAGE电泳和用小鼠抗人ζ链蛋白的单抗在流式细胞仪中鉴定重组蛋白的表达.结果:克隆的人TCRζ链cDNA插入昆虫杆状病毒载体,并在昆虫sf9细胞中特异地表达了蛋白.表达量约为细胞裂解上清液总蛋白的11%.经SDS-PAGE分析,其分子量大小与预期的重组ζ链蛋白一
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