【摘 要】
：
目的:构建含有人肾细胞癌特异性抗原G250(CAⅨ)主要T细胞表位区域、猴和鼠CAⅨ部分片段区域融合基因tG250的真核表达质粒,并在猴肾COS7细胞中表达.方法:通过基因合成和PCR技
【机 构】
：
军事医学科学院,解放军总医院,武警总医院
论文部分内容阅读
目的:构建含有人肾细胞癌特异性抗原G250(CAⅨ)主要T细胞表位区域、猴和鼠CAⅨ部分片段区域融合基因tG250的真核表达质粒,并在猴肾COS7细胞中表达.方法:通过基因合成和PCR技术构建人、猴和鼠G250区域融合基因tG250,将其插入含有人Igk链前导信号肽(sig)、人IgG_Fc和糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定信号肽融合基因序列的细胞膜锚定修饰真核表达载体pCI-Fc-GPI中,继而又将酶切后的sig-tG250-Fc-GPI融合基因导入含有细小病毒内部核糖体结合位点(IRES)基因且可以共表达人GM-CSF和B7.1融合基因的真核表达载体pVAX1-IRES-GM/B7中;将构建的重组质粒pVAX1-sig-tG250-Fc-GPI-GM/B7转染COS7细胞,利用流式细胞仪和免疫荧光检测其表达.结果:测序结果表明tG250融合基因序列正确,PCR和酶切鉴定证明已将其连入真核表达载体pVAX1-IRES-GM/B7中;流式细胞仪和免疫荧光的检测结果显示,重组质粒pVAX1-sig-tG250-Fc-GPI-GM/B7在COS7细胞中得到很好的表达.结论:构建了重组质粒pVAX1-sig-tG250-Fc-GPI-GM/B7,且在COS7细胞中有效表达,为以G250为靶点的抗肾细胞癌基因疫苗的构建与功能研究奠定了基础.
其他文献
目的:观察重组腺病毒介导的心肌营养素-1(Adv-CT1)及CT-1基因转染的神经干细胞(NSC-CT1)对创伤性脑损伤(TBI)大鼠模型脑功能障碍的作用.方法:以Adv-CT1转染NSCs,Adv-CT1以及N
本文首先对电力营销管理信息系统的组成和特点进行了分析，然后阐述了电力营销管理信息系统在用电管理中的应用，希望能为电力营销管理系统的进一步发展做出一定的贡献。
我市是农业大市，要建设高标准农田水利，便于中低产田的土地治理、发展现代农业，首先要解决农田的用水困境，建立一个完善的高标准农田水利建设体系是目前农田用水的势必要求。从多
随着社会的发展和电力体制改革的不断推进，电力营销逐渐成为电力行业经营与发展中很重要的一个环节。电力企业要想在激烈的竞争中保持优势地位，并不断发展壮大，必须抛弃传统垄断
目的:克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白fimA基因,并使其在大肠杆菌中融合表达。方法:利用PCR方法克隆fimA,并用基因重组融合表达技术获得在大肠杆菌中的表达。结果:克隆基因测序结
目的 研究γ射线对人外周血淋巴细胞 cx43和ANLN基因转录表达的影响.方法 对数生长期的淋巴细胞,分别给予1、2、3、4、5、6 Gy的60Coγ射线照射,照射后12 h,以及2 Gy照射后4
研究猪油、淀粉和鸡蛋3种酵解液与磁黄铁矿、黄铁矿间的相互作用。结果表明3种酵解液水溶性有机物群中,因某些有机物质的活性的存在而与氧化状态中硫化矿粉间有明显的相互作
在兔的动物实验中,为了减少动物的痛苦,保证实验操作顺利进行,经常采用麻醉处理.但是麻醉期间容易出现实验兔肺水肿问题,导致动物死亡,实验失败.我们在一例麻醉引起的实验兔
目的 探讨构建兔HPRT基因打靶载体的方法,为下一步获得兔 HPRT基因敲除动物模型和转基因兔奠定基础.方法 首先在已经筛选到含有兔全长次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶 (Hypoxa
从牙鲆(Paralichthys olivaceus)海水循环养殖系统中移动床生物滤器载体生物膜上获取异养细菌、氨化细菌和硝化细菌样本.异养细菌用平板涂布法计数,其代谢活性以培养8 h的氧