论文部分内容阅读
目的探讨影响冬虫夏草扩增片断长度多态性（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）的主要因素，建立并优化冬虫夏草AFLP反应体系。方法变性裂解液法提取冬虫夏草基因组cDNA，分别用一步法和两步法进行酶切与连接，再进行预扩增、选扩后，聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，银染检测。结果本研究建立适用于冬虫夏草的AFLP体系：用乙醇沉淀cDNA，建立的模板不含PCR反应抑制剂及其他酶反应抑制剂，可被限制性内切酶MseI和EeoRI完全酶切；确定两步法进行酶切、连接，酶切时间为3