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【摘要】目的:建立通天口服液中马兜铃酸A的含量测定法。方法:色谱柱为DiamonsilTM C18 （5μm,4.6×250mm）；流动相为0.02%十二烷基硫酸钠溶液-乙腈（50：50），用磷酸调pH值为2.0；检测波长为390nm。结果:在0.817-8.168ng进样范围内,马兜铃酸A的峰面积与进样量线性关系良好(r=0. 99973)。结论:该法可用于通天口服液中马兜铃酸A的含量检测。
【关键词】通天口服液；马兜铃酸A；HPLC法
通天口服液处方中的细辛药材含有肾毒性成分马兜铃酸A，为保证产品的安全性，参考文献方法[1]-[3]建立了通天口服液中马兜铃酸的含量测定方法。
1 仪器与试药
仪器：Agilent 1100 series高效液相色谱仪包括四元泵， 柱温箱，自动进样器，二级管阵列检测器。马兜铃酸A对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号为0746-200103；乙腈为色谱纯由美国Fisher公司提供；其余均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备：取本品20ml，加1mol/L氢氧化钠溶液调pH=12～13，加乙醚萃取3次，每次20ml，弃去乙醚溶液，水溶液加5mol/L盐酸溶液调pH=2～3，加乙醚萃取4次，每次15ml，合并乙醚溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇分次溶解，转入5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜滤过作为供试品溶液。
2.2 色谱条件色谱柱： DiamonsilTM C18 （5μm,4.6×250mm）；流动相的选择： 0.02%十二烷基硫酸钠溶液-乙腈（50：50），用磷酸调pH值为2.0；流速：1.0mL·min-1；检测波长：390nm；进样量：10μl。
2.3线性关系考察：分别精密称定马兜铃酸A对照品适量，加甲醇溶解，配制成浓度为0.4084μg/ml的马兜铃酸A对照品溶液2、5、10、15、20μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，绘制标准曲线，回归方程为：Y=2.02454589X+0.0674531，r=0.99973。结果表明马兜铃酸A进样量在0.817-8.168ng范围内有良好的线性关系。
2.4精密度试验：取浓度为0.4084μg/ml的马兜铃酸A对照品溶液，进样5次，进样量为10μl，相对偏差RSD为1.0%（n=5）。结果表明，精密度良好。
2.6最低检测限：按信噪比S/N计算，马兜铃酸A的最低检测限为0.204ng。
2.7药材及6批通天口服液样品的测定：分别取我厂一直使用产于辽宁的汉城细辛、及六批通天口服液样品，照拟订的色谱条件下测定，结果表明产于辽宁的汉城细辛、通天口服液中均未检出马兜铃酸A。
3 讨论
筆者选择3种波长（254nm、317nm、390nm）对马兜铃酸A、汉城细辛药材、通天口服液样品及阴性对照样品进行扫描，结果发现390nm作为测定波长时，无干扰。
参考文献
[1] Xie Zhao-ming,Li Shun-xiang.Determination of aristolochic acid A in herba asari by HPLC.中南药学2003.6.1
[2] 英锡相，袁昌鲁，曲贤广等 11种中药材及3种中成药马兜铃酸的含量测定．辽宁中医杂志 2003，30（5）：404
[3] 谢昭明，李顺祥，廖汉成 HPLC法测定细辛药材中马兜铃酸A的含量．中南药学 2003，1（3）：164
作者简介：彭涛，男，（1973.4-），重庆云阳，高级工程师，主要从事中药新药开发和质量标准研究工作
【关键词】通天口服液；马兜铃酸A；HPLC法
通天口服液处方中的细辛药材含有肾毒性成分马兜铃酸A，为保证产品的安全性，参考文献方法[1]-[3]建立了通天口服液中马兜铃酸的含量测定方法。
1 仪器与试药
仪器：Agilent 1100 series高效液相色谱仪包括四元泵， 柱温箱，自动进样器，二级管阵列检测器。马兜铃酸A对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号为0746-200103；乙腈为色谱纯由美国Fisher公司提供；其余均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备：取本品20ml，加1mol/L氢氧化钠溶液调pH=12～13，加乙醚萃取3次，每次20ml，弃去乙醚溶液，水溶液加5mol/L盐酸溶液调pH=2～3，加乙醚萃取4次，每次15ml，合并乙醚溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇分次溶解，转入5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，0.45μm滤膜滤过作为供试品溶液。
2.2 色谱条件色谱柱： DiamonsilTM C18 （5μm,4.6×250mm）；流动相的选择： 0.02%十二烷基硫酸钠溶液-乙腈（50：50），用磷酸调pH值为2.0；流速：1.0mL·min-1；检测波长：390nm；进样量：10μl。
2.3线性关系考察：分别精密称定马兜铃酸A对照品适量，加甲醇溶解，配制成浓度为0.4084μg/ml的马兜铃酸A对照品溶液2、5、10、15、20μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，绘制标准曲线，回归方程为：Y=2.02454589X+0.0674531，r=0.99973。结果表明马兜铃酸A进样量在0.817-8.168ng范围内有良好的线性关系。
2.4精密度试验：取浓度为0.4084μg/ml的马兜铃酸A对照品溶液，进样5次，进样量为10μl，相对偏差RSD为1.0%（n=5）。结果表明，精密度良好。
2.6最低检测限：按信噪比S/N计算，马兜铃酸A的最低检测限为0.204ng。
2.7药材及6批通天口服液样品的测定：分别取我厂一直使用产于辽宁的汉城细辛、及六批通天口服液样品，照拟订的色谱条件下测定，结果表明产于辽宁的汉城细辛、通天口服液中均未检出马兜铃酸A。
3 讨论
筆者选择3种波长（254nm、317nm、390nm）对马兜铃酸A、汉城细辛药材、通天口服液样品及阴性对照样品进行扫描，结果发现390nm作为测定波长时，无干扰。
参考文献
[1] Xie Zhao-ming,Li Shun-xiang.Determination of aristolochic acid A in herba asari by HPLC.中南药学2003.6.1
[2] 英锡相，袁昌鲁，曲贤广等 11种中药材及3种中成药马兜铃酸的含量测定．辽宁中医杂志 2003，30（5）：404
[3] 谢昭明，李顺祥，廖汉成 HPLC法测定细辛药材中马兜铃酸A的含量．中南药学 2003，1（3）：164
作者简介：彭涛，男，（1973.4-），重庆云阳，高级工程师，主要从事中药新药开发和质量标准研究工作