【摘 要】
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旨在探讨N端测序作为单克隆抗体常规放行分析方法的适用性。应用Edman降解法、质量肽图法对两个针对不同靶点的单抗进行N端测序,用肽图法寻找二者的特征性鉴别肽段,用离子色
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项(No.2014ZX09304311-001)资助~~
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旨在探讨N端测序作为单克隆抗体常规放行分析方法的适用性。应用Edman降解法、质量肽图法对两个针对不同靶点的单抗进行N端测序,用肽图法寻找二者的特征性鉴别肽段,用离子色谱、毛细管区带电泳和成像毛细管等点聚焦电泳进行异质性分析。Edman降解法显示两个单抗轻链和重链的15个氨基酸分别完全一致,质量肽图法显示二者轻重链的T1肽段分别完全一致,而肽图法和3种异质性分析方法则可对两个抗体进行有效鉴别。由于人源化或人源单抗序列框架数量较为有限,两个单抗的N末端序列完全相同,运用Edman降解法进行N端测序是否能作为单抗的常规放行分析方法值得进一步商榷,同时上述多种方法可运用于单抗的鉴别分析,并可对其异质性进行控制,较N端测序分析更具有客观性。
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