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在产业化家禽生产中，制定一套防控球虫病的方案是确保或提高家禽畜牧学性能和经济效益的最重要决策之一。通常，这些方案会采用在饲料中添加抗球虫药的方法，并同从传统上来说这足以控制临床球虫病。尽管在饲料中添加了抗球虫药，但各种抗球虫药物的轮换使用，加之联合使用化学类和离子载体类药物或穿梭用药方案，抗球虫药的耐药性问题在球虫病预防上正显得日益重要。大多数抗球虫药，如化学类和离子载体类药物，已出现了耐药性问题。检测艾美尔球虫的药物敏感性水平唯一可行的方法是体内抗球虫药敏感性试验（Anticoccidial Sensitivity Test，AST）。目前，球虫活疫苗的使用正越来越普遍，因为当抗球虫药失效时，球虫疫苗通常能提供一种解决方案。实际上，某些球虫活疫苗能够恢复艾美尔球虫对抗球虫药物的敏感性。
1 现在评估
为了评估Hipracox球虫活疫苗的有效性，研究人员在生产现场就其对球虫的敏感性进行了一项试验。该试验在荷兰一家拥有5栋鸡舍、每个生产周期总饲养约16万羽鸡的鸡场内进行。试验鸡不进行公母性别分群，大约32～35日龄开始减少饲养密度， 42日龄上市。在免疫接种前，由于该鸡场频繁发生球虫病，鸡场被兽医主管认定为问题鸡场：通常，通过每克粪便的球虫卵囊计数（Oocyst Per Gram，OPG）、病变评分或粪便带血情况均证明球虫病症状明显。为做好这一次的评估工作，研究人员利用从该场处于肥育期末期的肉鸡中分离的球虫分离株进行了6次AST试验，同时还进行了病变评分、OPG，并在研究中计算了所有生产周期的生产成绩。
2 病变评分总平均值
病变评分总平均值（Total Mean Lesion Score，TMLS）是根据Johnson和Reid的方法，于同一个生产周期中在指定时间内对堆型艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫和柔嫩艾美尔球虫引发的各自病变进行评分后所获得平均值（Mean Lesion Score，MLS）的总和。接种疫苗前的生产周期TMSL值为1.49，比欧盟的平均水平1.11高了34 %（图1）。第一个免疫（生产）周期的TMLS平均值低于EU的平均值（1.06对比1.11），第2个免疫（生产）周期的TMLS平均值进一步改善，低于EU平均值（0.85对比1.11），第3个免疫（生产）周期的TMLS平均值降至0.48。在第一个生产周期中经免疫后，TMLS较最后一个免疫（生产）周期的0.62有轻微的提高，但与免疫前鸡相比仍显著降低。
3 每克粪便的卵囊数（OPG）
分别于第7、14、21、28、35和42日龄每周采集一次样本用于计算OPG（图2）。在免疫的第1个周期中，球虫感染高峰出现在4周龄；之后鸡的免疫力较强，在35和42日龄时OPG较低。在免疫的第2个周期中，OPG峰值从4周龄提前至3周龄，但水平大幅低于第1个免疫周期。在第3个免疫周期中，OPG峰值再次出现在3周龄。对第1个免疫周期而言， OPG值在3周龄开始上涨，并于4周龄时达到峰值。
4 生产性能结果
生产性能分为了3个阶段：免疫前，免疫期间和免疫后（表1）。在恢复使用抗球虫药后，平均日增重（ADG） 免疫后提高1.28 g（免疫前鸡的ADG为58.27 g，免疫后为59.55 g），41日龄的屠宰体重免疫后2 441 g，较免疫前的2 389 g增加了52 g；饲料转化率（FCR），免疫前、免疫期间和免疫后分别为1.54、1.51和1.49，分别比免疫前降低了0.03和0.05。免疫前平均死亡率为2.96 %，而免疫期间死亡率降至2.47 %，降低了16.6 %。免疫后死亡率再次提高至2.58 %，但仍比免疫前降低了12.8 %。总的来看，欧洲生产效率因子（European Production Efficiency Factor，EPEF）从免疫前的368提高到了免疫期间的376（提高了8个点）和免疫后的389（提高了21个点）。
5 抗球虫药敏感性试验（ASTs）
在检查中，利用PCR对6个球虫分离株进行了分析，以确定存在哪些艾美尔属球虫（表2）。结果表明，在免疫前所有会影响肉鸡的5种艾美尔球虫在鸡场肥育末期均存在，说明该鸡场球虫的流行性较高（图3）。另一方面，在免疫后，仅检测出一种球虫。通常来说，当抗球虫药可以控制球虫病时，球虫的种类会减少。研究人员根据世界兽医寄生虫学促进会（World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology，WAAVP）指南进行了AST，以评估抗球虫药在肉鸡上的效果。为了研究该鸡场使用的抗球虫药（盐霉素、莫能菌素、甲基盐霉素/尼卡巴嗪）的敏感性，进行了6次独立的AST，样本分别来自免疫前、第1个、第2个和第3个免疫（生产）周期、免疫后的第1个和第2个生产周期的鸡。表3列出了每个分离株的试验设计：随机分组，每组3个重复，每个重要3羽鸡。通过观察肠道病变相对于NMI组的降低比例（%），分析敏感性结果（表4）：
● 耐药性：降低幅度≤30 %；
● 部分敏感性：降低幅度为31 %～49 %；
● 完全敏感性：降低幅度不小于50 %。
6 免疫效果
在该研究中，我们发现免疫前的TMLS高于免疫期间和免疫后，且与之前的情况相比，出现了显著的下降，尤其在第3个免疫（生产）周期。在全部3个免疫（生产）周期中，OPG峰值出现时间从28日龄提前至21日龄，而免疫后的峰值出现时间又回到了28日龄，这表明可能开始出现部分敏感性。
关于生产性能，我们发现免疫前肉鸡上市体重与免疫期间相近，但低于免疫后。对于ADG、2 000 g体重时的FCR（FCR2000）、死亡率和EPEF参数来说，免疫期间和免疫的值后均优于免疫前的。该研究中，在所有被监测参数上观察到的免疫前后的差异很清楚的表明，疫苗有助于提高球虫对抗球虫药的敏感性。
7 耐药性
PCR和AST检测结果均表明，免疫前鸡场中的球虫卵囊具有部分耐药性。免疫期间的耐药性下降，使卵囊对抗球虫药敏感，并在第3个免疫（生产）周期中达到最敏感。另一方面，在免疫后且采用与之前相同的抗球虫方案后，鸡场的球虫卵囊逐渐恢复到较高的耐药性水平。
综上所述，获得的数据表明，连续进行3次免疫可改变该鸡场的球虫耐药性，且至少可在免疫后的 2个生产周期中控制球虫问题。另一方面，免疫后第2个生产周期的球虫已经形成了一定程度耐药性，这表明连续进行3批免疫可能不足以彻底改变球虫对抗球虫药的敏感。
这可很可能是由于鸡场以前从未采用球虫苗进行免疫且艾美尔球虫已经达到了一个明显耐药水平的事实，以使连续进行3个生产周期的免疫还不足以完全恢复球虫对抗球虫药的敏感性。□□
原题名：Vaccination decreases resistance in coccidiosis（英文）
原作者：M. Dardi、M. Pages和J. Rubio（西班牙Girona省海博莱大药厂）、G. F. Mathis（美国格鲁吉亚州雅典市南方家禽研究公司）、M. De Gussem（比利时法兰德斯Vetworks公司）
1 现在评估
为了评估Hipracox球虫活疫苗的有效性，研究人员在生产现场就其对球虫的敏感性进行了一项试验。该试验在荷兰一家拥有5栋鸡舍、每个生产周期总饲养约16万羽鸡的鸡场内进行。试验鸡不进行公母性别分群，大约32～35日龄开始减少饲养密度， 42日龄上市。在免疫接种前，由于该鸡场频繁发生球虫病，鸡场被兽医主管认定为问题鸡场：通常，通过每克粪便的球虫卵囊计数（Oocyst Per Gram，OPG）、病变评分或粪便带血情况均证明球虫病症状明显。为做好这一次的评估工作，研究人员利用从该场处于肥育期末期的肉鸡中分离的球虫分离株进行了6次AST试验，同时还进行了病变评分、OPG，并在研究中计算了所有生产周期的生产成绩。
2 病变评分总平均值
病变评分总平均值（Total Mean Lesion Score，TMLS）是根据Johnson和Reid的方法，于同一个生产周期中在指定时间内对堆型艾美尔球虫、巨型艾美尔球虫和柔嫩艾美尔球虫引发的各自病变进行评分后所获得平均值（Mean Lesion Score，MLS）的总和。接种疫苗前的生产周期TMSL值为1.49，比欧盟的平均水平1.11高了34 %（图1）。第一个免疫（生产）周期的TMLS平均值低于EU的平均值（1.06对比1.11），第2个免疫（生产）周期的TMLS平均值进一步改善，低于EU平均值（0.85对比1.11），第3个免疫（生产）周期的TMLS平均值降至0.48。在第一个生产周期中经免疫后，TMLS较最后一个免疫（生产）周期的0.62有轻微的提高，但与免疫前鸡相比仍显著降低。
3 每克粪便的卵囊数（OPG）
分别于第7、14、21、28、35和42日龄每周采集一次样本用于计算OPG（图2）。在免疫的第1个周期中，球虫感染高峰出现在4周龄；之后鸡的免疫力较强，在35和42日龄时OPG较低。在免疫的第2个周期中，OPG峰值从4周龄提前至3周龄，但水平大幅低于第1个免疫周期。在第3个免疫周期中，OPG峰值再次出现在3周龄。对第1个免疫周期而言， OPG值在3周龄开始上涨，并于4周龄时达到峰值。
4 生产性能结果
生产性能分为了3个阶段：免疫前，免疫期间和免疫后（表1）。在恢复使用抗球虫药后，平均日增重（ADG） 免疫后提高1.28 g（免疫前鸡的ADG为58.27 g，免疫后为59.55 g），41日龄的屠宰体重免疫后2 441 g，较免疫前的2 389 g增加了52 g；饲料转化率（FCR），免疫前、免疫期间和免疫后分别为1.54、1.51和1.49，分别比免疫前降低了0.03和0.05。免疫前平均死亡率为2.96 %，而免疫期间死亡率降至2.47 %，降低了16.6 %。免疫后死亡率再次提高至2.58 %，但仍比免疫前降低了12.8 %。总的来看，欧洲生产效率因子（European Production Efficiency Factor，EPEF）从免疫前的368提高到了免疫期间的376（提高了8个点）和免疫后的389（提高了21个点）。
5 抗球虫药敏感性试验（ASTs）
在检查中，利用PCR对6个球虫分离株进行了分析，以确定存在哪些艾美尔属球虫（表2）。结果表明，在免疫前所有会影响肉鸡的5种艾美尔球虫在鸡场肥育末期均存在，说明该鸡场球虫的流行性较高（图3）。另一方面，在免疫后，仅检测出一种球虫。通常来说，当抗球虫药可以控制球虫病时，球虫的种类会减少。研究人员根据世界兽医寄生虫学促进会（World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology，WAAVP）指南进行了AST，以评估抗球虫药在肉鸡上的效果。为了研究该鸡场使用的抗球虫药（盐霉素、莫能菌素、甲基盐霉素/尼卡巴嗪）的敏感性，进行了6次独立的AST，样本分别来自免疫前、第1个、第2个和第3个免疫（生产）周期、免疫后的第1个和第2个生产周期的鸡。表3列出了每个分离株的试验设计：随机分组，每组3个重复，每个重要3羽鸡。通过观察肠道病变相对于NMI组的降低比例（%），分析敏感性结果（表4）：
● 耐药性：降低幅度≤30 %；
● 部分敏感性：降低幅度为31 %～49 %；
● 完全敏感性：降低幅度不小于50 %。
6 免疫效果
在该研究中，我们发现免疫前的TMLS高于免疫期间和免疫后，且与之前的情况相比，出现了显著的下降，尤其在第3个免疫（生产）周期。在全部3个免疫（生产）周期中，OPG峰值出现时间从28日龄提前至21日龄，而免疫后的峰值出现时间又回到了28日龄，这表明可能开始出现部分敏感性。
关于生产性能，我们发现免疫前肉鸡上市体重与免疫期间相近，但低于免疫后。对于ADG、2 000 g体重时的FCR（FCR2000）、死亡率和EPEF参数来说，免疫期间和免疫的值后均优于免疫前的。该研究中，在所有被监测参数上观察到的免疫前后的差异很清楚的表明，疫苗有助于提高球虫对抗球虫药的敏感性。
7 耐药性
PCR和AST检测结果均表明，免疫前鸡场中的球虫卵囊具有部分耐药性。免疫期间的耐药性下降，使卵囊对抗球虫药敏感，并在第3个免疫（生产）周期中达到最敏感。另一方面，在免疫后且采用与之前相同的抗球虫方案后，鸡场的球虫卵囊逐渐恢复到较高的耐药性水平。
综上所述，获得的数据表明，连续进行3次免疫可改变该鸡场的球虫耐药性，且至少可在免疫后的 2个生产周期中控制球虫问题。另一方面，免疫后第2个生产周期的球虫已经形成了一定程度耐药性，这表明连续进行3批免疫可能不足以彻底改变球虫对抗球虫药的敏感。
这可很可能是由于鸡场以前从未采用球虫苗进行免疫且艾美尔球虫已经达到了一个明显耐药水平的事实，以使连续进行3个生产周期的免疫还不足以完全恢复球虫对抗球虫药的敏感性。□□
原题名：Vaccination decreases resistance in coccidiosis（英文）
原作者：M. Dardi、M. Pages和J. Rubio（西班牙Girona省海博莱大药厂）、G. F. Mathis（美国格鲁吉亚州雅典市南方家禽研究公司）、M. De Gussem（比利时法兰德斯Vetworks公司）