【摘 要】
：
建立一种有效提高重组5型腺相关病毒（rAAV5）实心载体比率的阴离子交换层析的纯化方法。对亲和层析捕获的rAAV5样品，使用多种阴离子交换层析柱进行离子强度线性梯度洗脱，CIMmultus QA（CIMQ）层析柱能够有效分离不含目的基因组的病毒（病毒空颗粒）和含目的基因组的病毒（实心载体）。基于CIMQ层析柱，进行纯化缓冲液体系、紫外目标峰收集范围的优化。通过qPCR检测病毒基因组（Vg）含量计算
【基金项目】
：
天津市自然科学基金项目（No.18JCQNJC09700）；
论文部分内容阅读
建立一种有效提高重组5型腺相关病毒（rAAV5）实心载体比率的阴离子交换层析的纯化方法。对亲和层析捕获的rAAV5样品，使用多种阴离子交换层析柱进行离子强度线性梯度洗脱，CIMmultus QA（CIMQ）层析柱能够有效分离不含目的基因组的病毒（病毒空颗粒）和含目的基因组的病毒（实心载体）。基于CIMQ层析柱，进行纯化缓冲液体系、紫外目标峰收集范围的优化。通过qPCR检测病毒基因组（Vg）含量计算回收率，高效液相色谱法（HPLC）或体积排阻色谱-多角度静态光散射技术（SEC-MALS）测定实心载体比率。使用Tris, Na2HPO4, pH 8.0缓冲体系，洗脱时收集紫外吸收值UV260/UV280比值大于1的部分，收集的样品实心载体比率达到80.3%。成功建立一种简单方便的阴离子交换层析方法，能去除rAAV5样品中的病毒空颗粒，使实心载体比率达到基因治疗临床产品要求。
其他文献
HAZOP分析方法（Hazard and Operability Studies危险与可操纵性方法），是一种系统化、科学化的技术和方法，在化学化工等领域内，被得到广泛的应用识别和分析化工生产过程和重要设备运行中的安全生产风险和偏差因素，提前采取预防措施，避免安全事故的发生。利用知识谱图和结合计算机进行半自动分析可以极大的提升HAZOP分析的效率[1]。
采用La掺杂和固态电解质Li1.3Al0.3Ti1.7（PO4）3包覆对LiNi0.9Co0.05Mn0.05O2进行改性，研究掺杂和包覆对LiNi0.9Co0.05Mn0.05O2结构与性能的影响。结果表明：适量的La掺杂可以降低LiNi0.9Co0.05Mn0.05O2材料的离子迁移阻抗，提高Li+扩散系数，稳定材料的结构，从而提高材料的放电比容量及循环性能，当La掺杂量为0.1 wt%时，首
辐射监测系统作为“华龙一号”核电装备的重要组成部分，不仅能够保障核电站安全运行，同时也能够保障工作人员、公众和环境的安全。本文分析了“华龙一号”全球首堆福清核电5号机组的辐射监测系统的配置，分别从传感器和设备层面对国产化情况进行了探讨。本文从产品线、技术指标、资质等方面论述了国产厂家与进口厂家之间的差距，并阐述了差距产生的原因。本文对后续核电厂辐射监测设备的国产化路径和趋势进行了探讨，可为辐射监测
土壤镉（Cd）污染已经成为我国主要的土壤重金属污染类型之一，极大地危害了环境质量、人类健康和国家粮食安全。为了降低镉污染的影响，近年来研究者基于物理、化学、生物的基本知识，开发了各种土壤修复技术，旨在降低重金属的浓度及生物利用度。本文综述了不同镉污染土壤修复技术，包括物理修复技术、化学修复技术和生物修复技术等；重点讨论了这些修复技术的原理、适用条件、优缺点、技术可行性；对镉污染土壤修复技术的发展方
随着我国土壤污染防治的快速发展,物理修复、化学修复等常用的土壤修复技术逐渐成熟,并积累了丰富的工程经验。大型污染场地如工矿、化工企业等遗留场地的环境条件复杂、污染问题显著,场地污染风险评估存在一定不确定性,增加了治理难度和成本。以上海市某大型污染场地土壤修复工程为例,总结了修复实践经验并提出优化设计,旨在为后续污染情况较复杂的大型土壤修复工程提供思路和参考。
华东某历史钢铁厂经过前期土壤污染状况调查与风险评估确定地块内土壤存在多环芳烃（PAHs）、石油烃(C10～C40)和重金属（砷、钴）的单一或复合污染，需要开展修复治理工作。本文结合地块污染特征及实际工程条件，确定了修复总体思路，在此基础上选择了适合的修复技术，采取异位化学氧化、异位热脱附、土壤化学淋洗以及上述技术工艺组合，制定了土壤修复技术方案，并通过小试试验，确定了修复技术可行性，可为类似复杂场
自贸区是国内国际双循环下新一轮改革开放的“试验田”,新发展格局依赖于扩大内需和提高居民收入，如何深化收入分配改革是我国经济高质量发展面临的重大挑战。本文以自贸区政策为准自然实验，以2009—2019年沪深A股上市公司为样本，采用多期双重差分法检验自贸区政策对企业劳动收入份额的影响。研究发现，自贸区政策显著提升了劳动收入份额，进一步分析发现，自贸区政策主要通过改善企业竞争环境提高劳动收入份额，其对非
挪威建筑学家诺伯舒兹用现象学“重返于物”的方法，着眼于“具体环境特性”，这种特性与人的“认同感”链接，给人“存在的立足点的感受”即“定居”的感受。诺伯舒兹的建筑现象学是在“日常环境”中来探究人与物之间的关系的本质下的场所精神为何之方法。对于有“东巴文化活化石”之称的俄亚大村民居建筑用此方法加以研究，分析建筑与特定人群、特定地景之间相互作用，找出其场地特性、场所精神等与其居住使用建造者及其日常之关联
目的 研制重组5型腺相关病毒（recombinant type 5 adeno-associated virus,rAAV5）基因组滴度测定用国家标准品。方法 对三质粒系统制备的rAAV5-GFP原液，按《中国药典》三部（2020版）相关要求进行鉴别、外观、pH、无菌、基因组滴度、纯度、感染滴度等检定，根据结果稀释、分装，制备成候选标准品；采用热加速试验对候选标准品进行稳定性考察；组织3家实验室，
保持企业创新的可持续性是经济高质量发展的重要因素。作为国有企业改革的重要方式，混合所有制改革对国有企业创新可持续性具有深远影响。以2008—2021年中国沪深A股国有上市公司为研究对象，实证考察了国有企业混合所有制改革对企业创新可持续性的影响及其作用机制。研究发现，国有企业混合所有制改革有助于提升企业创新可持续性。机制分析表明，国有企业混合所有制改革通过提高企业管理效率，从而提升企业的创新可持续性