E2F－1截短体的诱饵载体的构建及检测

来源 :广东医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ff303

【摘要】

：

目的构建E2F-1截短体的诱饵载体，并进行自激活活性和诱饵蛋白毒性检测，为应用酵母双杂交系统筛选与E2F—1相互作用蛋白建立实验基础。方法设计引物，PCR扩增E2F-1截短体，引入酶切

【作者】

：

孔凡彪王晓通谢玉波肖强

【机构】

：

广西医科大学第一附属医院胃肠腺体外科,广西医科大学第一附属医院麻醉科

【出处】

：

广东医学

【发表日期】

：

2011年20期

【关键词】

：

E2F-1截短体诱饵表达载体酵母双杂交自激活

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目的构建E2F-1截短体的诱饵载体，并进行自激活活性和诱饵蛋白毒性检测，为应用酵母双杂交系统筛选与E2F—1相互作用蛋白建立实验基础。方法设计引物，PCR扩增E2F-1截短体，引入酶切位点EcoR I和BamH I，将E2F-1截短体连接至载体pGBKT7中，将构建成功的诱饵表达载体pGBKT7-E2F-1截短体转化到酵母菌AH109中，采用选择性培养皿和8-半乳糖苷酶分析等方法分析检测重组质粒的自激活活性和细胞毒性。结果成功扩增了E2F-1截短体，并连接至载体pGBKT7中，测序比对结果正确，成功转化到

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