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[摘 要] 某鸡场发生了鸡只精神不振，采食下降，拉稀，扭头等症状，发病急、病程短，发病率与死亡率均较高。经流行病学调查，临床症状，病理剖检和采集病料做进一步的血凝抑制试验和病原分离鉴定，确诊为新城疫病毒与巴氏杆菌混合感染。经过采取一系列综合防治措施后，疫情基本得到了控制，鸡群逐渐恢复健康。
[关键词] 鸡 新城疫 巴氏杆菌 混合感染 诊断 治疗
[中图分类号] S831 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650（2016）09-0263-02
鸡新城疫俗称假鸡瘟、亚洲鸡瘟，是由鸡新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性传染病，属于副黏病毒科，以春季发病较多，呈地方流行性，死亡率高达90%。鸡巴氏杆菌病又称鸡霍乱、鸡出血性败血症，是由多杀性巴氏杆菌引起的以败血症和炎性出血过程为主要特征的鸡的传染病[1]。某鸡场发生了以呼吸困难，腹泻和神经症状为主要特征的传染病，经流行病学调查，临床症状，病理剖检和进一步的病原分离鉴定及HI，确诊为鸡新城疫病毒与巴氏杆菌的混合感染。
1 材料与方法
1.1 病料来源：无菌采集该场濒死病鸡的心、肝、肺等典型病变部位、随机采集10份鸡血并分离血清。
1.2 试验材料：染色液、培养基、9～11日龄鸡胚、单道移液器、微型振荡器、新城疫标准阳性血清、反应板（96孔V型有机板）
1.3 临床诊断：流行特点调查、临床症状和病理变化观察
1.4 细菌分离培养：用病料直接涂片染色镜检，将病料以无菌操作按常规方法接种于血清营养肉汤、麦康凯琼脂平板，并于37℃恒温箱中培养24h。
1.5 药敏试验：按常规培养基扩散法，测试该场分离到的细菌对强力霉素、卡那霉素、氨苄青霉素、磺胺嘧啶、先锋霉素、金霉素、环丙杀星等药物的敏感性，观察并记录结果。
1.6 HI：对10份血清，按照β—微量法测定新城疫抗体的效价。
1.7 病毒分离与鉴定：将病料混合研磨用灭菌生理盐水稀释，反复冻融3次，离心取上清液，加青、链霉素各1000IU，接种于5枚9～10日龄鸡胚尿囊腔内每枚0.2ml，另取2枚作空白对照。在37℃条件下培养，每8h照蛋一次，弃去24h内死亡的鸡胚，取死亡鸡胚尿囊液做HA，并观察鸡胚病变。同时用新城疫标准阳性血清与具有血凝性的鸡胚尿囊液进行HI并按1∶20比例混合，以37℃作用30min后每枚0.2ml接种鸡胚5枚，继续孵育，并收集鸡胚尿囊液测定其血凝性，记录结果[2]。
2 结果与讨论
2.1 流行特点调查、临床症状和病理变化观察
2.1.1 流行特点调查
该场于某种鸡场购进鸡苗10000羽，7日龄鸡每只颈部皮下注射新城疫灭活疫苗0.2ml，30日龄胸肌注射新城疫I系疫苗2羽份，注射后第二天开始发病，病鸡食欲减退，精神沉郁，拉黄白绿色稀粪，个别病鸡出现扭颈、歪头等神经症状，该鸡场周围养殖场在该场发病之前也有类似病情出现，发病后用强力霉素和卡那霉素治疗无效。
2.1.2 临床症状
病鸡精神沉郁，缩颈呆立，半闭眼，采食量直线下降，食欲减少或废绝，羽毛松乱，脱水，脚、翅麻痹，鸡冠肉髯发绀，呼吸困难，伸颈张口呼吸，口腔内有大量酸臭粘液，并发出“咯咯”的喘鸣声，排黄色、白色、绿色稀粪，且发出腥臭味。
2.1.3 病理变化
对该鸡场的数只濒死病鸡进行剖检，其主要病变：嗉囊内有大量稀薄酸臭液体，嗉囊壁、喉头、气管出血，肺脏有出血点并有大小不一的肉变区；心包膜增厚，心包腔内有黄色纤维素性渗出液，心冠脂肪、心外膜有针尖大小的出血点；肝未见肿大，但质脆，表面散在有小米粒大小的灰白色坏死点；腺胃乳头和乳头间有少量出血，肌胃角质层下有出血斑；十二指肠出血严重，有枣核状溃疡灶，盲肠、泄殖腔有大小不等的出血点；肠道黏膜多处淋巴滤泡和盲肠扁桃体肿大出血。
2.2 细菌鉴别
2.2.1 染色镜检
经碱性美兰染色镜检可看到两极浓染的小杆菌，用革兰氏染色可见单个、散在的革兰氏阴性、卵圆形的短小杆菌。
2.2.2 细菌分离培养
血清营养肉汤培养后呈轻度混浊，管底有粘稠沉淀物，振荡不散，肉汤表面出现菌环；血液琼脂平板长出湿润露珠样小菌落，菌落周围整齐，不溶血，麦康凯琼脂平板上不生长。
2.3 病毒测试与鉴定
2.3.1 血凝抑制试验
试验结果显示抗体水平参差不齐，鸡只受病毒感染程度不均一。
2.3.2 病毒分离与鉴定
接种病料鸡胚培养至36～48h全部死亡，对照组鸡胚72h后仍存活。死亡鸡胚全身充血，胚体头、颈、翅处均有出血斑，尿囊液清亮。试验组血凝价最高达9log2，对照组HA血凝价均为0（见表2）。中和试验中接种鸡胚在孵育120h后，没有死亡，收集尿囊液测定其血凝性为阴性，鸡胚发育正常，证明分离到的为新城疫病毒。
2.4 治疗措施
2.4.1 药敏试验
药敏试验结果见表3。
试验结果显示对磺胺嘧啶、环丙杀星及先锋霉素较敏感，在治疗过程中应用此类药物效果。
2.4.2 治疗方案：综合上述诊断结果，我们针对该鸡场情况制定了综合治疗措施，及时处理死鸡，隔离病鸡，用消毒剂对鸡舍进行彻消毒。对未发病鸡用新城疫IV系弱毒活疫苗2头份滴鼻点眼，同时肌肉注射2头份新城疫灭活苗，用0.3%的磺胺类药物与0.1%的环丙沙星交替饮水、拌料进行治疗，并给予多种维生素。
该场在接种当天死亡近350只，以后几天死亡数量逐渐减少，十天后病情得到控制，基本不再有死亡，十五天后鸡群恢复正常。据有关报道，新城疫在紧急免疫接种4天后即可停止死亡[3]，而本场经十天病情才得到控制，笔者认为与该场的饲养管理情况及新城疫病毒与巴氏杆菌的混合感染有关。
3 小结
3.1 通过流行病学调查、临床症状、病理剖检检查和实验室诊断综合分析，最终确诊该鸡场本次发病属于鸡新城疫病毒与巴氏杆菌混合感染。
3.2 该场新城疫灭活疫苗注射量不够，没有配合弱毒疫苗滴鼻点眼，抗体水平较低，鸡只存在潜伏感染，肌肉注射毒力相对较强的新城疫I系疫苗引起的应激反应导致了新城疫的发生，进而继发了巴氏杆菌病。
3.3 由于抗生素类药物的广泛应用，引起了多杀性巴氏杆菌感染菌株对药物敏感性不同，导致了耐药性产生，因此做药敏试验很有必要。
3.4 建立严格的卫生防疫制度，严禁从疫区引进种蛋和雏鸡，进出鸡场的人员和车辆严格消毒，防止外疫传入，鸡场要实行“全进全出”饲养方式，老龄鸡淘汰后鸡舍要严格消毒，避免周期性传染。
参考文献：
[1]卢中华主编.动物微生物学[M].北京：中国科学技术出版社，1999：259-260
[2]曹斌，谢献胜，黄秀明等.鸽新城疫的诊断及病原分离鉴定[J].畜牧与兽医，2003，35（7）：31-31
[3]尹荣兰，秦晓光等.鸽新城疫、巴氏杆菌混合感染的诊断[J].黑龙江畜牧兽医，2006，27（8）：15-17
[4]狄志刚.蛋鸡巴氏杆菌病的诊断与防治[J].畜禽业，2006（16）：37-40
作者简介：乔春杰（1981），女，汉，周口市商水县，兽医师，大专，动物疫病诊疗方向
[关键词] 鸡 新城疫 巴氏杆菌 混合感染 诊断 治疗
[中图分类号] S831 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650（2016）09-0263-02
鸡新城疫俗称假鸡瘟、亚洲鸡瘟，是由鸡新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性传染病，属于副黏病毒科，以春季发病较多，呈地方流行性，死亡率高达90%。鸡巴氏杆菌病又称鸡霍乱、鸡出血性败血症，是由多杀性巴氏杆菌引起的以败血症和炎性出血过程为主要特征的鸡的传染病[1]。某鸡场发生了以呼吸困难，腹泻和神经症状为主要特征的传染病，经流行病学调查，临床症状，病理剖检和进一步的病原分离鉴定及HI，确诊为鸡新城疫病毒与巴氏杆菌的混合感染。
1 材料与方法
1.1 病料来源：无菌采集该场濒死病鸡的心、肝、肺等典型病变部位、随机采集10份鸡血并分离血清。
1.2 试验材料：染色液、培养基、9～11日龄鸡胚、单道移液器、微型振荡器、新城疫标准阳性血清、反应板（96孔V型有机板）
1.3 临床诊断：流行特点调查、临床症状和病理变化观察
1.4 细菌分离培养：用病料直接涂片染色镜检，将病料以无菌操作按常规方法接种于血清营养肉汤、麦康凯琼脂平板，并于37℃恒温箱中培养24h。
1.5 药敏试验：按常规培养基扩散法，测试该场分离到的细菌对强力霉素、卡那霉素、氨苄青霉素、磺胺嘧啶、先锋霉素、金霉素、环丙杀星等药物的敏感性，观察并记录结果。
1.6 HI：对10份血清，按照β—微量法测定新城疫抗体的效价。
1.7 病毒分离与鉴定：将病料混合研磨用灭菌生理盐水稀释，反复冻融3次，离心取上清液，加青、链霉素各1000IU，接种于5枚9～10日龄鸡胚尿囊腔内每枚0.2ml，另取2枚作空白对照。在37℃条件下培养，每8h照蛋一次，弃去24h内死亡的鸡胚，取死亡鸡胚尿囊液做HA，并观察鸡胚病变。同时用新城疫标准阳性血清与具有血凝性的鸡胚尿囊液进行HI并按1∶20比例混合，以37℃作用30min后每枚0.2ml接种鸡胚5枚，继续孵育，并收集鸡胚尿囊液测定其血凝性，记录结果[2]。
2 结果与讨论
2.1 流行特点调查、临床症状和病理变化观察
2.1.1 流行特点调查
该场于某种鸡场购进鸡苗10000羽，7日龄鸡每只颈部皮下注射新城疫灭活疫苗0.2ml，30日龄胸肌注射新城疫I系疫苗2羽份，注射后第二天开始发病，病鸡食欲减退，精神沉郁，拉黄白绿色稀粪，个别病鸡出现扭颈、歪头等神经症状，该鸡场周围养殖场在该场发病之前也有类似病情出现，发病后用强力霉素和卡那霉素治疗无效。
2.1.2 临床症状
病鸡精神沉郁，缩颈呆立，半闭眼，采食量直线下降，食欲减少或废绝，羽毛松乱，脱水，脚、翅麻痹，鸡冠肉髯发绀，呼吸困难，伸颈张口呼吸，口腔内有大量酸臭粘液，并发出“咯咯”的喘鸣声，排黄色、白色、绿色稀粪，且发出腥臭味。
2.1.3 病理变化
对该鸡场的数只濒死病鸡进行剖检，其主要病变：嗉囊内有大量稀薄酸臭液体，嗉囊壁、喉头、气管出血，肺脏有出血点并有大小不一的肉变区；心包膜增厚，心包腔内有黄色纤维素性渗出液，心冠脂肪、心外膜有针尖大小的出血点；肝未见肿大，但质脆，表面散在有小米粒大小的灰白色坏死点；腺胃乳头和乳头间有少量出血，肌胃角质层下有出血斑；十二指肠出血严重，有枣核状溃疡灶，盲肠、泄殖腔有大小不等的出血点；肠道黏膜多处淋巴滤泡和盲肠扁桃体肿大出血。
2.2 细菌鉴别
2.2.1 染色镜检
经碱性美兰染色镜检可看到两极浓染的小杆菌，用革兰氏染色可见单个、散在的革兰氏阴性、卵圆形的短小杆菌。
2.2.2 细菌分离培养
血清营养肉汤培养后呈轻度混浊，管底有粘稠沉淀物，振荡不散，肉汤表面出现菌环；血液琼脂平板长出湿润露珠样小菌落，菌落周围整齐，不溶血，麦康凯琼脂平板上不生长。
2.3 病毒测试与鉴定
2.3.1 血凝抑制试验
试验结果显示抗体水平参差不齐，鸡只受病毒感染程度不均一。
2.3.2 病毒分离与鉴定
接种病料鸡胚培养至36～48h全部死亡，对照组鸡胚72h后仍存活。死亡鸡胚全身充血，胚体头、颈、翅处均有出血斑，尿囊液清亮。试验组血凝价最高达9log2，对照组HA血凝价均为0（见表2）。中和试验中接种鸡胚在孵育120h后，没有死亡，收集尿囊液测定其血凝性为阴性，鸡胚发育正常，证明分离到的为新城疫病毒。
2.4 治疗措施
2.4.1 药敏试验
药敏试验结果见表3。
试验结果显示对磺胺嘧啶、环丙杀星及先锋霉素较敏感，在治疗过程中应用此类药物效果。
2.4.2 治疗方案：综合上述诊断结果，我们针对该鸡场情况制定了综合治疗措施，及时处理死鸡，隔离病鸡，用消毒剂对鸡舍进行彻消毒。对未发病鸡用新城疫IV系弱毒活疫苗2头份滴鼻点眼，同时肌肉注射2头份新城疫灭活苗，用0.3%的磺胺类药物与0.1%的环丙沙星交替饮水、拌料进行治疗，并给予多种维生素。
该场在接种当天死亡近350只，以后几天死亡数量逐渐减少，十天后病情得到控制，基本不再有死亡，十五天后鸡群恢复正常。据有关报道，新城疫在紧急免疫接种4天后即可停止死亡[3]，而本场经十天病情才得到控制，笔者认为与该场的饲养管理情况及新城疫病毒与巴氏杆菌的混合感染有关。
3 小结
3.1 通过流行病学调查、临床症状、病理剖检检查和实验室诊断综合分析，最终确诊该鸡场本次发病属于鸡新城疫病毒与巴氏杆菌混合感染。
3.2 该场新城疫灭活疫苗注射量不够，没有配合弱毒疫苗滴鼻点眼，抗体水平较低，鸡只存在潜伏感染，肌肉注射毒力相对较强的新城疫I系疫苗引起的应激反应导致了新城疫的发生，进而继发了巴氏杆菌病。
3.3 由于抗生素类药物的广泛应用，引起了多杀性巴氏杆菌感染菌株对药物敏感性不同，导致了耐药性产生，因此做药敏试验很有必要。
3.4 建立严格的卫生防疫制度，严禁从疫区引进种蛋和雏鸡，进出鸡场的人员和车辆严格消毒，防止外疫传入，鸡场要实行“全进全出”饲养方式，老龄鸡淘汰后鸡舍要严格消毒，避免周期性传染。
参考文献：
[1]卢中华主编.动物微生物学[M].北京：中国科学技术出版社，1999：259-260
[2]曹斌，谢献胜，黄秀明等.鸽新城疫的诊断及病原分离鉴定[J].畜牧与兽医，2003，35（7）：31-31
[3]尹荣兰，秦晓光等.鸽新城疫、巴氏杆菌混合感染的诊断[J].黑龙江畜牧兽医，2006，27（8）：15-17
[4]狄志刚.蛋鸡巴氏杆菌病的诊断与防治[J].畜禽业，2006（16）：37-40
作者简介：乔春杰（1981），女，汉，周口市商水县，兽医师，大专，动物疫病诊疗方向