研究miR-497和PlexinA4在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)进展过程中的作用。
方法利用qRT-PCR和免疫组织化学分析喉鳞癌及癌旁正常黏膜标本中miR-497和靶基因PlexinA4表达情况;并评价它们的临床意义及与预后的关系;通过生物信息学预测miR-497的靶基因PlexinA4,并利用双荧光素酶报告基因验证;将PlexinA4siRNA转染至喉鳞癌细胞,通过Transwell法观察PlexinA4 siRNA对喉鳞癌细胞侵袭的影响;构建pcDNA3.1(+)PlexinA4过表达质粒转染至喉鳞癌细胞,Transwell法观察pcDNA3.1(+)PlexinA4对喉鳞癌细胞侵袭的影响。
结果miR-497在喉鳞癌中低表达,并与病理分化程度明显相关,PlexinA4mRNA在喉癌中高表达。生存分析表明miR-497高表达组患者的预后好于miR-497低表达组,差异有统计学意义(χ2=10.342,P=0.001);Cox回归分析显示miR-497是喉鳞癌患者预后的独立影响因素。双荧光素酶报告基因示野生型PlexinA4荧光活性变化倍数与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。而突变型与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。在细胞系Hep-2,TU212中PlexinA4 siRNA组穿过小室的细胞数分别为70.00±10.85,85.00±6.45,对照组为141.67±10.58,138.84±9.88,差异有统计学意义(F值分别为30.251,23.936,P值均<0.05);pcDNA3.1(+)/PlexinA4组穿过小室的细胞数分别为170.56±11.95,142.00±10.43,对照组为81.37±7.25,79.45±7.21,差异有统计学意义(F值分别为35.104,29.643,P值均<0.05)。
结论miR-497在喉鳞癌中表达下降,具有抑癌基因的作用,同时伴有miR-497低表达的个体预后不良,且这一分子特征是喉鳞癌患者预后的独立危险因素。miR-497通过调控PlexinA4影响喉鳞癌的侵袭。