Epstein—Barr病毒DNA多聚酶基因扩增和表达载体构建

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目的 扩增Epstein-Barr病毒(EBV)DNA多聚酶基因,构建高效表达载体。方法 根据EBV全基因序列,在EBV DNA多聚酶基因的3’、5’端设计一对附加EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点的特异性引物,以B95-8细胞DNA为模板,采用改良PCR方法扩增出EBV DNA多聚酶基因(3044bp)。用EcoRⅠ和HindⅢ酶切该基因片断并克隆有达载体pMAL-p2,采用蓝白斑试验筛先阳性菌落。
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