【摘 要】
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目的:建立人的可溶性PD-1(sPD-1)酶标检测试剂盒并探讨其检测的临床意义。方法:在已成功获得两株识别位点不同的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2和5F10)的基础上,采用该室制备
【机 构】
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苏州大学医学部药学院,苏州大学医学生物技术研究所江苏省临床免疫学重点实验室,苏州大学附属一院血液科
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目的:建立人的可溶性PD-1(sPD-1)酶标检测试剂盒并探讨其检测的临床意义。方法:在已成功获得两株识别位点不同的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2和5F10)的基础上,采用该室制备的鼠抗人PD-1分子单克隆抗体(1F2)作为包被抗体,应用本室制备的单抗5F10经生物素(biotin)标记后作为检测抗体,建立双单抗夹心的人sPD-1酶标检测方法,并对健康供血员、甲亢、血液病患者的血清中sPD-1的含量进行了检测。结果:成功研制了人sPD-1酶联检测试剂盒,其灵敏度为200.00pg/ml。该试剂盒4℃放置1个月,离散度(CV%)<±5.17,回收率为95%～115%,提示该检测试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。用该试剂盒测得血清中sPD-1的正常值为1.103±0.240ng/ml,再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量明显高于正常对照组,而甲亢和器官移植病人血清中sPD-1的含量和正常值相比没有显著差异(P<0.05)。结论:成功研制了检测人sPD-1酶标检测试剂盒,并首次发现再生障碍性贫血患者血清中sPD-1的含量较高,该试剂盒在临床病人sPD-1的检测中具有潜在的应有价值。
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