【摘 要】
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目的 观察和探讨腺病毒介导降钙素基因相关肽(CGRP)体外转染对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 SD大鼠建立同种异体左肺移植模型.设立假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)、空载体对照组(C组)和基因转染组(D组).D组供肺体外转染增强型绿色荧光蛋白标记降钙素基因相关肽重组腺病毒载体(Ad5-CGRP-EGFP),颗粒滴度为3.2×109vp/ml.供肺保存6 h行左肺
【机 构】
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350001福州,福建医科大学附属协和医院胸外科,350001福州,福建医科大学附属协和医院心外科,350001福州,福建医科大学附属协和医院神经外科,广东省人民医院
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目的 观察和探讨腺病毒介导降钙素基因相关肽(CGRP)体外转染对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 SD大鼠建立同种异体左肺移植模型.设立假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)、空载体对照组(C组)和基因转染组(D组).D组供肺体外转染增强型绿色荧光蛋白标记降钙素基因相关肽重组腺病毒载体(Ad5-CGRP-EGFP),颗粒滴度为3.2×109vp/ml.供肺保存6 h行左肺原位移植.4 h后检测动脉血气分析和气道内压(AWP);荧光显微镜下观察移植肺组织绿色荧光变化;放射免疫法测定移植肺组织CGRP含量;检测移植肺湿-干重比率(W/D)比率、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性;光镜观察移植肺病理组织学变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定移植肺肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10表达水平.结果 B、C、D组出现明显IRI反应.但D组IRI反应明显减轻.荧光显微镜下C组和D组标本呈强绿色荧光反应.放射免疫法测定D组肺组织CGRP含量明显升高,AWP下降,PaO2上升、PaCO2下降、W/D比率下降,SOD活性增高,MDA含量和MPO活性下降;D组病理组织学检查示肺组织炎细胞浸润、水肿和渗出改变明显减轻;TNF-α表达水平下调、IL-10表达水平增强.结论 CGRP体外转染可明显减轻IRI对供肺的损害,对大鼠肺移植的供肺起保护作用。
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