pSG5/TRIF质粒的构建及在Huh7细胞中的表达

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:peiyhpyh
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目的构建pSG5/Myc-TRIF质粒,并检验其在Huh7细胞中的瞬时表达。方法首先用NotⅠ酶切既往构建的pCX4pur/Myc-TRIF质粒,平末端化,然后用EcoRⅠ酶切,获得TRIF片断。用SmaⅠ和EcoRⅠ先后酶切空载体pSG5。各酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。与预期吻合后,电泳回收靶片段。行连接反应。经筛选阳性克隆,扩大培养、提取、纯化重组质粒。BamHⅠ酶切鉴定重组质粒pSG5/Myc-TRIF。分别用FuGene6转染试剂和重组牛痘病毒(rVV)预感染后用Lipofectin转染重组质
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