【摘 要】
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糖基化是蛋白质非酶修饰的一种常见形式.尽管食品中蛋白质的糖基化许多年前已为大家所知,对糖基化产物的定性与定量分析仍然是一项富有挑战性的工作.本文研究了大麦蛋白质Z的
【机 构】
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江南大学生物工程学院,214122
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糖基化是蛋白质非酶修饰的一种常见形式.尽管食品中蛋白质的糖基化许多年前已为大家所知,对糖基化产物的定性与定量分析仍然是一项富有挑战性的工作.本文研究了大麦蛋白质Z的糖基化作用.大麦麦芽中的蛋白质Z是影响啤酒成分的最重要蛋白质之一.本实验通过凝胶电泳,液相色谱和质谱的联用对制麦时期的这一修饰过程进行了研究.在制麦的不同阶段于大麦谷粒中提取水溶性蛋白,进而利用凝胶电泳方法分离,大麦蛋白质Z的条带清晰的出现在43KDa处.再进行基于辅助基质激光解吸技术的质谱分析,研究发现在制麦的第二天就可以检测到蛋白质Z的糖基化,糖基化后的多肽在质谱中m/z为2619.为了验证糖基化的影响,又进行了串联质谱实验(MS/MS),同时检测到了未修饰的多肽(m/z为2457)和已修饰的多肽(m/z为2619).本研究成功的建立了一种监控制麦过程的方法,该方法利用质谱分析技术,以蛋白质Z为标准参照物,对糖基化多肽进行监控.研究证实了利用串联质谱分析的可行性,通过该方法可以获得更多多肽修饰方面的信息.
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