探讨miRNA-101、ZESTE基因增强子同源物2 (EZH2)及转化生长因子(TGF)-β1在幼鼠单侧输尿管完全梗阻(CUUO)肾脏中的表达和意义。
方法选取30只SD雄性幼鼠,周龄(6±1)周,体质量(150±10) g,采用随机数字表法分为sham组、CUUO 7 d组、CUUO 14 d组,每组10只。分别于梗阻后7 d及14 d处死取其梗阻侧肾脏,横断面切开分为均等的上下段2部分,上段部分用于Western blot检测肾脏TGF-β1及EZH2的表达;下段部分再纵切为均等的2部分,一部分用于实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同梗阻时间段肾脏miRNA-101的表达,另一部分用于免疫组织化学及HE染色检测肾脏TGF-β1及EZH2的定性表达。
结果RT-PCR结果显示miRNA-101相对表达量:sham组是CUUO 14 d组的(12.69±1.60)倍,CUUO 7 d组是14 d组的(3.74±1.24)倍,3组间差异有统计学意义(P<0.05);Western blot显示TGF-β1相对表达量在CUUO 14 d、7 d及sham组分别为1.14±0.12、1.04±0.14和0.76±0.18;EZH2相对表达量在CUUO 14 d、7 d及sham组分别为1.04±0.04、0.89±0.03和0.73±0.02;miRNA-101与EZH2表达呈负相关(r=-0.92,P<0.05),与TGF-β1表达呈负相关(r=-0.63,P<0.05),EZH2与TGF-β1表达呈正相关(r=0.67,P<0.05)。不同梗阻时间肾脏miRNA-101、EZH2及TGF-β1的表达均具有明显相关性。
结论随着梗阻时间的延长,miRNA-101表达下降,EZH2及TGF-β1表达上升,提示miRNA-101可能通过调节幼鼠肾脏EZH2表达影响肾间质纤维化进展。