【摘 要】
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目的建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)的方法,为A.muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持。方法建立SYBR GreenⅠ荧光PCR定量检
【基金项目】
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成都市科技惠民项目(No.2015-HM01-00498-SF)资助
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目的建立实时荧光PCR定量检测粪便中Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)的方法,为A.muciniphila的定量检测及深入研究提供技术支持。方法建立SYBR GreenⅠ荧光PCR定量检测A.muciniphila的方法,利用A.muciniphila标准品制备标准曲线,评价该方法的灵敏度、特异性、抗干扰性及重复性,并对30例人粪便样本进行检测。结果标准曲线线性关系良好(R2=0.999);方法灵敏度可达到1.0×102 CFU/mL;该方法可特异性扩增A.muciniphila,不受其他肠道细菌的影响;组内和组间重复性较好,Ct值的变异系数均小于2%;30例人粪便样品中A.muciniphila阳性率为73%,Ct值为17.40~31.77。结论本研究建立的实时荧光PCR定量检测粪便中A.muciniphila的方法简便、快速、经济,且具有良好的灵敏度、特异性、抗干扰性和重复性,适用于实际粪便样品的检测。
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