【摘 要】
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目的：构建人附睾蛋白4（HE4）的原核表达系统,纯化重组蛋白并检测其活性。方法：提取卵巢透明癌细胞总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,分别构建pGEX-4T-1-HE4和PET26b-HE4两种原核表
【机 构】
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原子高科股份有限公司,中国原子能科学研究院,中国食品药品检定研究院
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目的：构建人附睾蛋白4（HE4）的原核表达系统,纯化重组蛋白并检测其活性。方法：提取卵巢透明癌细胞总RNA,利用RT-PCR技术扩增HE4基因,分别构建pGEX-4T-1-HE4和PET26b-HE4两种原核表达系统。以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导重组蛋白表达,最后采用SDS-PAGE和HE4商品化免疫分析试剂盒对表达产物进行鉴定。结果：成功构建了两种HE4融合蛋白的重组表达质粒,表达产物经SDS-PAGE鉴定,分别在相对分子量约38 000处和12 000处见到表达条带,并可与HE4单克
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