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通过监测大肠杆菌碱性磷酸酶(AP)的109位色氨酸(Trp-109)室温Lin光(RTP)的强度与寿命的变化,探讨了变性剂酸、盐酸及EDTA对AP构象变化的影响。结果表明:Lin光强度、Lin寿命与Trp-109所处的微环境刚性化程度有密切的关系。尤其是盐酸胍的加入,AP经历了曲型的3种变化状态:从稳定折叠态到中间态,最后形成展开态。极少量的EDTA加入,导致蛋白质变性、Lin光减弱和Lin光寿命缩短。