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[摘 要]文章分析了不同配比头孢他啶/三唑巴坦（CAZ/TAZ）的体外抗菌活性。
[关键词]头孢他啶 三唑巴坦 抑菌浓度
中图分类号：TH552 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）10-0298-01
三唑巴坦（他唑巴坦，Tazobactam， TAZ）为新型β-内酰胺酶抑制剂，在舒巴坦（Sulbactam， SBT）基础上增加了一个三氮唑环， 是舒巴坦的衍生物，具有广谱抑酶活性，对各种细菌产生的酶均有很强的抑制作用，这与三唑巴坦可形成稳定的瞬时中间产物（transient intermediate）有关。头孢他啶（Ceftazidime， CAZ）为第三代头孢菌素，抗菌谱广，抗菌作用强，对金葡菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等均有较强抗菌作用，并且头孢他啶是头孢类中唯一一个对假单孢类细菌有活性的抗生素。为评价不同配比CAZ/TAZ和CAZ的抗菌活性，我们进行了体外抗菌活性研究。
1 材料与方法
1.1 药物及其配制
头孢他啶（Ceftazidime， CAZ）批号030113，含量88.4%，珠海区丽珠合成制药有限公司产品；三唑巴钠（他唑巴坦钠，Tazobactam，TAZ）批号03020016，含量92.4%，山东齐鲁制药有限公司产品；头孢哌酮（Cefoperazone，CPZ）批号31810610， 含量93.5%， 珠海联邦制药有限公司产品；舒巴坦钠（Sulbactam， SBT）批号31330103，含量91.6%，珠海联邦制药有限公司产品；均由哈尔滨星火药物研究院提供。哌拉西林（Piperacillin， PIPC）批号0419—9502，含量91.3%，头孢噻肟（Cefotaxime，CTX）批号130483-200102，含量90.6%，头孢他啶（Ceftazidime， CAZ）批号0484-9901，含量84.9%，克拉维酸（Clavulanic acid， CVA）批号429-9301，含量92.0%，苯唑西林（Oxacillin）批号0482-9901，含量90.4%，均为 中国 药品生物制品检定所标准品。药物配制时按实际活性药物 计算 。Nitrocefin纸片为美国DIFCO公司产品。
1.2 培养基和试剂
MH肉汤（Mueller-Hinton Broth）培养基、脑心浸液（Brain Heart Infusion）培养基均为美国DIFCO公司产品；MH琼脂培养基、营养肉汤和小牛血清由中国药品生物制品检定所购进。
1.3 细菌
选用金葡菌ATCC29213、肺炎链球菌ATCC49619、粪肠球菌ATCC29212、大肠埃希菌ATCC25922、ATCC35218、铜绿假单胞菌ATCC27853作为质控菌，质控菌MIC均在NCCLS规定范围内。
细菌β-内酰胺酶（β-lactamase）用Nitrocefin纸片测定，大肠埃希菌和肺炎克雷白杆菌超广谱酶（Extend-spectrum β-lactamases， ESBLs）用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸测定， 耐甲氧西林金葡菌（MRSA）、耐甲氧西林表葡菌（MRSE）用苯唑青霉素（Oxacillin）测定，具体方法均按照NCCLS规定要求进行。醋酸钙不动杆菌ESBLs测定参照大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌方法进行。
1.4 仪器
多点接种器（Multipoint inoculator A400）为英国DENLEY公司产品；自动分装器（Automatic dispensor）为美国OXFORD公司产品；二氧化碳培养箱为美国FORMA公司产品；超低温（-80℃）冰箱为日本SANYO公司产品。广州仪科实验室技术公司IKA（r） MS2型液体涡漩混合器。
1.5 最低抑菌浓度（MIC）测定
参照NCCLS2003标准， 采用平皿琼脂二倍稀释法和Denlay多点接种器（Multipoint Inoculator A400）进行藥敏实验，试验菌用营养肉汤及脑心浸液增菌；药物用MH肉汤二倍稀释成各种所需浓度，分别加适量到平皿中，MH琼脂培养基溶化后定量注入含药液平皿内混匀， 药物的终浓度分别为 0.03……128mg/L， 肺炎链球菌、化脓链球菌和粪肠球菌的培养基内含5%脱纤维的羊血，接种试验菌（接种量约为104CFU/点）后置35℃恒温培养18h（肺炎链球菌培养24h、化脓链球菌置5%CO2培养箱培养24h）后观察结果，无菌生长的平皿中所含药物最小的浓度即为最低抑菌浓度（MIC）。
2 结果
不同配比CAZ/TAZ（1：1、2：1、4：1、8：1）对812株临床分离致病菌的MIC测定结果见表1。结果表明，不同配比CAZ/TAZ对812株临床分离菌均有广谱抗菌作用，CAZ/TAZ 1：1、2：1、4：1的抗菌活性相近， 稍强于CAZ/TAZ 8：1。
不同配比CAZ/TAZ对全部产酶的111株大肠埃希菌、110株肺炎克雷伯杆菌的MIC50值均为0.25mg/L，对74株醋酸钙不动杆菌的MIC50值为2mg/L，均比CAZ强2倍，优于PIPC/TAZ、CPZ/SBT。CAZ/TAZ 1：1、2：1、4：1对产ESBLs的17株大肠埃希菌、39株肺炎克雷伯杆菌、10株醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强2～8倍，稍优于CAZ/TAZ 8：1，强于PIPC/TAZ 32～64倍、CPZ/SBT 8～16倍。不同配比CAZ/TAZ对不产ESBLs的94株大肠埃希菌、71株肺炎克雷伯杆菌、10株醋酸钙不动杆菌的抗菌活性与CAZ相近，优于PIPC/TAZ、CPZ/SBT，但对醋酸钙不动杆菌的抗菌活性稍弱于CPZ/SBT。
不同配比CAZ/TAZ对65株产酶、9株不产酶铜绿假单胞菌的抗菌活性均与CAZ相近，MIC50值均为2mg/L，优于PIPC/TAZ、CPZ/SBT；对产酶的19株阴沟肠杆菌、18株产气肠杆菌、37株粘质沙雷氏菌的抗菌活性比CAZ强2～4倍，明显优于PIPCZ/TAZ，对阴沟肠杆菌、产气肠杆菌的抗菌活性与CPZ/SBT相近，对粘质沙雷氏菌的抗菌活性优于CPZ/SBT。
3 讨论
三唑巴坦是大鹏药品 工业 株式会社首先合成的β-内酰胺酶抑制剂，是典型的不可逆竞争性β-内酰胺酶抑制剂， 能有效抑制革兰阴性菌产生的各种质粒介导的β-内酰胺酶，对肺炎克雷伯杆菌、拟杆菌等产生的染色体介导酶及葡萄球菌产生的青霉素酶具有抑制作用， 抑酶作用强于舒巴坦，与克拉维酸相近。
随着头孢类抗生素尤其第三代头孢类抗生素在临床上广泛应用，细菌耐药越来越多，近几年产ESBLs细菌尤其大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌报道不少，本文按照NCCLS规定的产ESBLs鉴别方法，筛选了111株大肠埃希菌和110株肺炎克雷伯杆菌，得到产ESBLs的大肠埃希菌17株、肺炎克雷伯杆菌39株，产酶率分别为15.3%、35.5.8%，均低于 文献 报道，这可能由于地区不同所致。 不同配比CPZ/TAZ对产普通β-内酰胺酶的110株大肠埃希菌、110株肺炎克雷伯杆菌、74株醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强2倍，但对产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强约4～8倍。
总之，三唑巴坦与头孢他啶的配合使用，增强了头孢他啶的抗菌活性，头孢他啶/三唑巴坦1：1、2：1、4：1、8：1均有较强的抗菌活性，明显优于头孢他啶，值得进一步开发研究，尤其头孢他啶/三唑巴坦4：1复方制剂。
参考文献
[1] 赵龙吟，游雪甫，娄人慧，张伟新，王跃明，陈慧贞.不同配比头孢他啶/三唑巴坦钠的体外抗菌活性研究，论文网，2011.06.
[关键词]头孢他啶 三唑巴坦 抑菌浓度
中图分类号：TH552 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）10-0298-01
三唑巴坦（他唑巴坦，Tazobactam， TAZ）为新型β-内酰胺酶抑制剂，在舒巴坦（Sulbactam， SBT）基础上增加了一个三氮唑环， 是舒巴坦的衍生物，具有广谱抑酶活性，对各种细菌产生的酶均有很强的抑制作用，这与三唑巴坦可形成稳定的瞬时中间产物（transient intermediate）有关。头孢他啶（Ceftazidime， CAZ）为第三代头孢菌素，抗菌谱广，抗菌作用强，对金葡菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等均有较强抗菌作用，并且头孢他啶是头孢类中唯一一个对假单孢类细菌有活性的抗生素。为评价不同配比CAZ/TAZ和CAZ的抗菌活性，我们进行了体外抗菌活性研究。
1 材料与方法
1.1 药物及其配制
头孢他啶（Ceftazidime， CAZ）批号030113，含量88.4%，珠海区丽珠合成制药有限公司产品；三唑巴钠（他唑巴坦钠，Tazobactam，TAZ）批号03020016，含量92.4%，山东齐鲁制药有限公司产品；头孢哌酮（Cefoperazone，CPZ）批号31810610， 含量93.5%， 珠海联邦制药有限公司产品；舒巴坦钠（Sulbactam， SBT）批号31330103，含量91.6%，珠海联邦制药有限公司产品；均由哈尔滨星火药物研究院提供。哌拉西林（Piperacillin， PIPC）批号0419—9502，含量91.3%，头孢噻肟（Cefotaxime，CTX）批号130483-200102，含量90.6%，头孢他啶（Ceftazidime， CAZ）批号0484-9901，含量84.9%，克拉维酸（Clavulanic acid， CVA）批号429-9301，含量92.0%，苯唑西林（Oxacillin）批号0482-9901，含量90.4%，均为 中国 药品生物制品检定所标准品。药物配制时按实际活性药物 计算 。Nitrocefin纸片为美国DIFCO公司产品。
1.2 培养基和试剂
MH肉汤（Mueller-Hinton Broth）培养基、脑心浸液（Brain Heart Infusion）培养基均为美国DIFCO公司产品；MH琼脂培养基、营养肉汤和小牛血清由中国药品生物制品检定所购进。
1.3 细菌
选用金葡菌ATCC29213、肺炎链球菌ATCC49619、粪肠球菌ATCC29212、大肠埃希菌ATCC25922、ATCC35218、铜绿假单胞菌ATCC27853作为质控菌，质控菌MIC均在NCCLS规定范围内。
细菌β-内酰胺酶（β-lactamase）用Nitrocefin纸片测定，大肠埃希菌和肺炎克雷白杆菌超广谱酶（Extend-spectrum β-lactamases， ESBLs）用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸测定， 耐甲氧西林金葡菌（MRSA）、耐甲氧西林表葡菌（MRSE）用苯唑青霉素（Oxacillin）测定，具体方法均按照NCCLS规定要求进行。醋酸钙不动杆菌ESBLs测定参照大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌方法进行。
1.4 仪器
多点接种器（Multipoint inoculator A400）为英国DENLEY公司产品；自动分装器（Automatic dispensor）为美国OXFORD公司产品；二氧化碳培养箱为美国FORMA公司产品；超低温（-80℃）冰箱为日本SANYO公司产品。广州仪科实验室技术公司IKA（r） MS2型液体涡漩混合器。
1.5 最低抑菌浓度（MIC）测定
参照NCCLS2003标准， 采用平皿琼脂二倍稀释法和Denlay多点接种器（Multipoint Inoculator A400）进行藥敏实验，试验菌用营养肉汤及脑心浸液增菌；药物用MH肉汤二倍稀释成各种所需浓度，分别加适量到平皿中，MH琼脂培养基溶化后定量注入含药液平皿内混匀， 药物的终浓度分别为 0.03……128mg/L， 肺炎链球菌、化脓链球菌和粪肠球菌的培养基内含5%脱纤维的羊血，接种试验菌（接种量约为104CFU/点）后置35℃恒温培养18h（肺炎链球菌培养24h、化脓链球菌置5%CO2培养箱培养24h）后观察结果，无菌生长的平皿中所含药物最小的浓度即为最低抑菌浓度（MIC）。
2 结果
不同配比CAZ/TAZ（1：1、2：1、4：1、8：1）对812株临床分离致病菌的MIC测定结果见表1。结果表明，不同配比CAZ/TAZ对812株临床分离菌均有广谱抗菌作用，CAZ/TAZ 1：1、2：1、4：1的抗菌活性相近， 稍强于CAZ/TAZ 8：1。
不同配比CAZ/TAZ对全部产酶的111株大肠埃希菌、110株肺炎克雷伯杆菌的MIC50值均为0.25mg/L，对74株醋酸钙不动杆菌的MIC50值为2mg/L，均比CAZ强2倍，优于PIPC/TAZ、CPZ/SBT。CAZ/TAZ 1：1、2：1、4：1对产ESBLs的17株大肠埃希菌、39株肺炎克雷伯杆菌、10株醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强2～8倍，稍优于CAZ/TAZ 8：1，强于PIPC/TAZ 32～64倍、CPZ/SBT 8～16倍。不同配比CAZ/TAZ对不产ESBLs的94株大肠埃希菌、71株肺炎克雷伯杆菌、10株醋酸钙不动杆菌的抗菌活性与CAZ相近，优于PIPC/TAZ、CPZ/SBT，但对醋酸钙不动杆菌的抗菌活性稍弱于CPZ/SBT。
不同配比CAZ/TAZ对65株产酶、9株不产酶铜绿假单胞菌的抗菌活性均与CAZ相近，MIC50值均为2mg/L，优于PIPC/TAZ、CPZ/SBT；对产酶的19株阴沟肠杆菌、18株产气肠杆菌、37株粘质沙雷氏菌的抗菌活性比CAZ强2～4倍，明显优于PIPCZ/TAZ，对阴沟肠杆菌、产气肠杆菌的抗菌活性与CPZ/SBT相近，对粘质沙雷氏菌的抗菌活性优于CPZ/SBT。
3 讨论
三唑巴坦是大鹏药品 工业 株式会社首先合成的β-内酰胺酶抑制剂，是典型的不可逆竞争性β-内酰胺酶抑制剂， 能有效抑制革兰阴性菌产生的各种质粒介导的β-内酰胺酶，对肺炎克雷伯杆菌、拟杆菌等产生的染色体介导酶及葡萄球菌产生的青霉素酶具有抑制作用， 抑酶作用强于舒巴坦，与克拉维酸相近。
随着头孢类抗生素尤其第三代头孢类抗生素在临床上广泛应用，细菌耐药越来越多，近几年产ESBLs细菌尤其大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌报道不少，本文按照NCCLS规定的产ESBLs鉴别方法，筛选了111株大肠埃希菌和110株肺炎克雷伯杆菌，得到产ESBLs的大肠埃希菌17株、肺炎克雷伯杆菌39株，产酶率分别为15.3%、35.5.8%，均低于 文献 报道，这可能由于地区不同所致。 不同配比CPZ/TAZ对产普通β-内酰胺酶的110株大肠埃希菌、110株肺炎克雷伯杆菌、74株醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强2倍，但对产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强约4～8倍。
总之，三唑巴坦与头孢他啶的配合使用，增强了头孢他啶的抗菌活性，头孢他啶/三唑巴坦1：1、2：1、4：1、8：1均有较强的抗菌活性，明显优于头孢他啶，值得进一步开发研究，尤其头孢他啶/三唑巴坦4：1复方制剂。
参考文献
[1] 赵龙吟，游雪甫，娄人慧，张伟新，王跃明，陈慧贞.不同配比头孢他啶/三唑巴坦钠的体外抗菌活性研究，论文网，2011.06.