腺相关病毒末端反向重复顺序折叠结构在真核细胞染色体基因组上的整合作用

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shi2007jie2008
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腺相关病毒(Adeno-associatedvirus,AAV)是一类线状单股DNA(SS-DNA)的微小病毒。依据Cavalier-Smith的SS-DNA病毒复制模型原理,将其末端反向重复顺序(ITRs)分离,变为折叠十字架结构,再以其发夹中的3'-OH为引物合成另一股姊妹染色体DNA,然后共价连接到亲代分子上,与辅助病毒Ad2和PAAV/Ad共转染真核生物细胞。Southern印迹分子杂交结果表明:插入这一折叠结构中由SV40早期启动子控制的报告基因-新霉素抗性基因拷贝已整合到细胞基因组染色体上,这种以无细菌DNA分子为支架的折叠结构不仅证明了Cavalier-Smith的理论,而且可望为外源基因导入真核细胞提供新的又一系统。 Adeno-associated virus (AAV) is a type of linear virus (SS-DNA) parvovirus. According to Cavalier-Smith’s principle of SS-DNA virus replication model, ITRs were separated into folded crosses, and the other 3’-OH was used as a primer to synthesize another sister chromosome DNA, and then covalently attached to the parental molecule, co-transfecting eukaryotic cells with the helper viruses Ad2 and PAAV / Ad. The results of Southern blot hybridization showed that the copy of neomycin resistance gene, a reporter gene controlled by the SV40 early promoter inserted into this folded structure, has been integrated into the genome of the cell genome. This folding structure with bacterial DNA as a scaffold It not only proved the theory of Cavalier-Smith, but also expected to provide a new system for the introduction of foreign genes into eukaryotic cells.
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