【摘 要】
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目的采用CO2超临界法制备一种新型的具有生物活性的聚乳酸(poly lactic acid,PLA)-骨基质明胶(bone matrix gelatin,BMG)多孔复合型骨支架材料,并检测骨诱导活性。方法选取健
【机 构】
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南方医科大学组织构建与检测重点实验室,中国辐射防护研究院生物材料制药技术研究所,唐山第二医院,北京工业大学应用数理学院
【基金项目】
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山西省青年科技基金课题资助项目(2006021050)~~
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目的采用CO2超临界法制备一种新型的具有生物活性的聚乳酸(poly lactic acid,PLA)-骨基质明胶(bone matrix gelatin,BMG)多孔复合型骨支架材料,并检测骨诱导活性。方法选取健康成人供体皮质骨进行脱脂、脱钙和脱蛋白处理制备BMG,将按体积比3∶1混合的BMG-PLA及纯PLA,分别置入超临界CO2反应装置中,同时加入粒径为100~200μm的NaCl颗粒作为制孔剂,反应制备多孔PLA-BMG和PLA复合材料。在含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中培养MC3T3-E1成骨前体细胞,按20μl/孔2×106/ml浓度的细胞悬液加入含不同材料的24孔培养板内共培养2周,其中PLA-BMG组:每孔含100μg粉碎的PLA-BMG复合材料;PLA组:每孔含100μg粉碎的PLA材料;DMEM高糖培养基组作为对照组;每组设6个复孔。通过茜素红S染色法染色钙化结节,定量分析钙化面积;收集共培养细胞并在1ml0.2%的Nonidet P-40溶液中超声裂解,检测细胞内钙含量和ALP活性。结果超临界CO2法所制备PLA-BMG多孔复合材料中BMG与PLA混合均匀,孔隙大小为50~150μm,孔径联通性好;PLA-BMG组ALP活性、钙含量及钙化面积均值分别为325.59±70.40U/gprot、3.51±1.64mmol/gprot和42.98%±4.44%,均高于PLA组63.62±30.01U/gprot、1.04±0.21mmol/gprot和9.55%±1.94%,及对照组2.40±1.47U/gprot、0.70±0.24mmol/gprot和0.86%±0.41%,比较差异均有统计学意义(P<0.05),且PLA组的ALP活性及钙化结节面积与对照组也有统计学意义(P<0.05)。结论采用CO2超临界法制备的PLA-BMG多孔复合支架材料具有良好的骨诱导活性,有可能作为一种有前景的骨植入材料及骨组织工程支架材料。
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