甘蓝型油菜BnClo1基因克隆、表达载体的构建及原核表达

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【目的】克隆甘蓝型油菜(Brassicanapus)油体钙蛋白(Caleosin)基因BnClo1,并进行原核表达研究。【方法】在获得甘蓝型油菜BnClo1基因全长cDNA的基础上,根据BnClo1基因编码区设计1对特异引物,以甘蓝型油菜种子总RNA为模板,通过RT-PCR获得了约750bp的cDNA片段,T/A克隆后进行序列测定。随后将该蛋白成熟肽eDNA片段克隆到原核表达载体pTYB12中,构建融合表达载体pTYB12-BnClo1,转化到EschericMacoiiER2566(DE3)中进行表达。
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