HPLC法测定猪尿酸酶活性

来源 :化学与生物工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户：qrdao

【摘要】

：

建立了一种测定重组猪尿酸酶活性的高效液相色谱方法。将重组猪尿酸酶基因工程菌的粗酶液与尿酸溶液反应5min,加入高氯酸溶液终止,经超滤后以体系中尿酸浓度的降低值为指标,

【作者】

：

陈思李辉马娇颖谢光蓉陈建华

【机构】

：

中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室

【出处】

：

化学与生物工程

【发表日期】

：

2012年6期

【关键词】

：

基因工程菌尿酸酶酶活性高效液相色谱 genetic engineering bacteria uricase enzyme activity hig

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建立了一种测定重组猪尿酸酶活性的高效液相色谱方法。将重组猪尿酸酶基因工程菌的粗酶液与尿酸溶液反应5min,加入高氯酸溶液终止,经超滤后以体系中尿酸浓度的降低值为指标,采用HPLC法[色谱条件：AgilentZorbax 300SB-C18色谱柱、流动相为磷酸-甲醇-双蒸水（3∶25∶472,体积比）、流速1.0mL·min-1、波长292nm]测定粗酶液活性。结果表明,尿酸在10～500μmol·L-1范围内线性关系良好,样品回收率在99%～104%之间。该方法不受杂质干扰、稳定、灵敏

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