用CRISPR／Cas9技术编辑KLF4基因对GES-1细胞生物学行为的影响

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：l_zhijie1234

【摘要】

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目的采用CRISPR／Cas9基因编辑技术，构建靶向KLF4的基因编辑质粒，建立CRISPR／Cas9．sgKLF4人正常胃黏膜GES-1细胞株，观察KLF4基因敲除效果及其对细胞生物学行为的影响。方法设计靶向K

【作者】

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赵荣荣任海风宋乐张倩范楚苓刘亚坤姜玉汪思应魏

【机构】

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安徽医科大学病理生理学教研室

【出处】

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安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2017年10期

【关键词】

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KLF4 CRISPR/Cas9 胃癌 GES-1 KLF4 CRISPR/Cas9 gastric cancer GES-1

【基金项目】

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国家自然科学基金（编号：81472330）

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目的采用CRISPR／Cas9基因编辑技术，构建靶向KLF4的基因编辑质粒，建立CRISPR／Cas9．sgKLF4人正常胃黏膜GES-1细胞株，观察KLF4基因敲除效果及其对细胞生物学行为的影响。方法设计靶向KLF4基因的sgRNA序列，将合成的片段插入到CRISPR／Cas9质粒骨架载体pX459中，再将重组后的质粒做转化，挑取克隆，扩增后提质粒进行测序验证正确性。将构建好的重组质粒体外转染人人胃黏膜细胞GES-1中，利用嘌呤霉素进行筛选获得KLF4敲除的克隆细胞，应用Westernblot技术检测未

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