【摘 要】
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本试验旨在建立一种乳品中大肠杆菌PMA-qPCR活菌检测方法。优化qPCR检测方法,探究菌浓度为1×108 CFU/mL的大肠杆菌活菌悬液、热致死菌悬液细胞数来确定不同的PMA剂量、
【机 构】
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吉林大学人兽共患病研究所,吉林工商学院,广泽乳业有限公司,山东省东营市利津县第二中学
【基金项目】
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吉林省重点科技攻关项目（20140204065NY）, 吉林省世行贷款农产品质量安全项目（2011-Y36）, 吉林省科技发展计划项目（201205054）, 粮油食品深加工省高校重点实验室项目（2014001）
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本试验旨在建立一种乳品中大肠杆菌PMA-qPCR活菌检测方法。优化qPCR检测方法,探究菌浓度为1×108 CFU/mL的大肠杆菌活菌悬液、热致死菌悬液细胞数来确定不同的PMA剂量、暗孵育时间、曝光时间对死菌抑制效果的影响,确定最佳PMA处理方案。结果表明,qPCR检测可特异性扩增大肠杆菌,1×108 CFU/mL的大肠杆菌经90℃水浴30s全部致死后,采用10μg/mL的PMA暗孵育15min后冰上曝光10min为最佳处理方案,这种处理方案可最大程度抑制死细胞信号,而对活细胞几乎没有
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