【摘 要】
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目的对刚地弓形虫三磷酸核苷水解酶基因（NTPase）进行克隆、表达和鉴定。方法采用PCR扩增刚地弓形虫RH株的NTPase基因，克隆入pGEM-TEasy载体，经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒p
【基金项目】
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浙江省科技计划项目基金（No.2006C33025）
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目的对刚地弓形虫三磷酸核苷水解酶基因（NTPase）进行克隆、表达和鉴定。方法采用PCR扩增刚地弓形虫RH株的NTPase基因，克隆入pGEM-TEasy载体，经酶切与测序鉴定后亚克隆至表达质粒pBAD-HisB，并转入大肠埃希菌（E.coli）BL21（DE3）中进行诱导表达。用镍-次氮基三乙酸亲和层析柱纯化重组质粒pBAD-HisB-NTPase表达产生的含组氨酸的重组蛋白，用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和蛋白质印迹（Western blotting）分析蛋白表达产物。结果P
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