【摘 要】
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稻瘟病新抗性基因Pi39来源于粳稻品种Q15,定位于水稻第12号染色体,前期研究发现候选基因区域预测有12个抗病相关候选基因,其中候选基因Pi39E最大,克隆的难度较大.为了构建Pi3
【机 构】
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中南民族大学生命科学学院,武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室,生物技术国家民委重点实验室,武汉,430074
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稻瘟病新抗性基因Pi39来源于粳稻品种Q15,定位于水稻第12号染色体,前期研究发现候选基因区域预测有12个抗病相关候选基因,其中候选基因Pi39E最大,克隆的难度较大.为了构建Pi39E长片段载体,本实验通过加大反应底物的浓度,目的片段的质量浓度为124 ng/μL,质粒载体的质量浓度为158 ng/μL,目的片断与质粒DNA按1.15:1的摩尔浓度比进行连接反应,在9μL的总体系中加入1μL的PEG4000,同时采用电击大肠杆菌DH5α转化方法优化实验方案,成功构建该载体.本结果对新抗性基因Pi39精细定位及其功能的研究具有重要意义.
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