敌草快中毒小鼠半数致死量及重要脏器损伤实验

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目的 探究敌草快染毒小鼠的半数致死量(LD50)并构建C57小鼠敌草快LD50中毒模型,以明确敌草快中毒后重要脏器的损伤性质和程度,为深入开展敌草快毒理研究提供科学依据.方法 (1)2018年11月,敌草快中毒小鼠LD50实验:8周龄雄性C57小鼠左侧腹腔注射敌草快,计算染毒后24 h、3 d、7 d和14 d的存活率和LD50;(2)2019年2月,构建LD50中毒模型,明确重要脏器损伤实验:小鼠腹腔注射LD50剂量敌草快,观察染毒后小鼠的一般情况和行为能力,不同时间点留取血样检验炎症指标,处死并解剖分离心、肺、肝、肾、脾和胃肠等脏器,行苏木精和伊红(HE)、Masson和天狼猩红染色了解脏器病理变化和纤维化程度.结果 (1)敌草快中毒早期小鼠即出现精神萎靡、毛发松散、进食少、尿少甚至无尿、蜷缩少动及前后肢活动不协调等现象,5 d后尚存活的小鼠上述症状减轻;(2)注射剂量为25和35 mg/kg组小鼠始终存活;45 mg/kg组7 d和14 d存活率均为83.3%;55 mg/kg组存活率为16.7%;65 mg/kg组小鼠2 d内全部死亡,LD50为49.75 mg/kg.(3)小鼠注射49.75 mg/kg敌草快构建LD50中毒模型,染毒后6 h血清促炎和抑炎因子都上升,均高于3 d和14 d水平,其中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素10(IL-10)浓度比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),3 d和14 d染毒小鼠各因子浓度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);(4)中毒早期小鼠脏器切片HE染色示肺、肝、肾和肠道正常结构破坏,并见较多炎性细胞浸润;中晚期天狼猩红和Masson染色仅发现1只14 d小鼠肺和肾轻微肺纤维化,1只21 d小鼠肾轻微纤维化,未发现肝脏纤维化.结论 本实验首次提供C57小鼠经腹腔注射敌草快的毒理学数据.8周龄雄性C57小鼠经左侧腹腔注射敌草快染毒,LD50为49.75 mg/kg,染毒早期小鼠一般情况和行为能力变差,肠道、肺脏和肾脏组织显著炎性损伤,3 d后炎症指标回降,14 d后个别小鼠有轻微的肾和肺纤维化.
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