游仆虫第一类肽链释放因子在大肠杆菌中的表达、纯化和鉴定

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nalbuphine
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为对肽链释放因子结构与功能进行研究,进而探讨纤毛虫这类生物中遗传密码表达特殊性的机理,利用PCR技术和基因重组技术构建了游仆虫第1类肽链释放因子eRFla及C端带6个组氨酸的eRFla(His)6的两个重组表达质粒pBV221-eRFla和pBV221-eRFla(His)6.在大肠杆菌DH5α中,通过42℃高温诱导3 h,eRFla和eRF1a(His)6获得了可溶性表达.eRFla(His)6的表达水平达到可溶性细菌总蛋白约8%,经Ni-NTA亲和层析和Hitrap Q离子交换层析,得到纯度较好的eR
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