【摘 要】
：
目的探讨S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响。方法构建S100A6基因RNAi载体，慢病毒转染A549肺腺癌细胞，共分为3组，①空载体对照组：转染不携带S100A6基因RNAi的空载质粒；②阴性对照组：未转染任何质粒；③S100A6 RNA干扰组：携带S100A6基因RNAi的质粒。应用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting鉴定S100A6基因和蛋白
【机 构】
：
710038 西安，第四军医大学唐都医院呼吸与危重症医学科,710038 西安，第四军医大学唐都医院呼吸与危重症医学科,710038 西安，第四军医大学唐都医院呼吸与危重症医学科,西安交通大学第二附属
论文部分内容阅读
目的探讨S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响。
方法构建S100A6基因RNAi载体，慢病毒转染A549肺腺癌细胞，共分为3组，①空载体对照组：转染不携带S100A6基因RNAi的空载质粒；②阴性对照组：未转染任何质粒；③S100A6 RNA干扰组：携带S100A6基因RNAi的质粒。应用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting鉴定S100A6基因和蛋白表达；采用四甲基偶氮唑蓝、迁移试验和流式细胞仪分别检测细胞增殖、浸润、细胞周期及细胞凋亡等生物学特性。
结果S100A6基因干扰后A549肺腺癌细胞S100A6 mRNA的表达(0.009±0.001)较阴性对照组(0.049±0.005)和空载体对照组(0.030±0.006)均有明显下降，差异均有统计学意义(t＝57.56，P＝0.000；t＝48.21，P＝0.000)。S100A6基因干扰后A549肺腺癌细胞S100A6蛋白的表达(0.107±0.002)较阴性对照组(0.341±0.005)和空载体对照组(0.311±0.006)均有明显下降，差异均有统计学意义(t＝37.34，P＝0.000；t＝27.51，P＝0.001)。48 h细胞增殖能力：RNA干扰组(0.230±0.008)较阴性对照组(0.292±0.038)和空载体对照组(0.307±0.013)降低，差异均有统计学意义(t＝25.31，P＝0.003；t＝29.42，P＝0.001)。细胞浸润能力：RNA干扰组细胞的穿膜细胞数(11.40个±1.36个)较阴性对照组(26.80个±1.83个)和空载体对照组(25.80个±1.93个)降低，差异有统计学意义(t＝29.44，P＝0.001；t＝23.17，P＝0.005)。细胞周期：RNA干扰组的S期细胞比例(28.26%±0.38%)显著低于空载体对照组(44.73%±0.66%)和阴性对照组(45.15%±1.69%)，差异有统计学意义(t＝63.69，P＝0.000；t＝71.55，P＝0.000)，RNA干扰组的G2-M期细胞比例(26.99%±0.29%)显著高于阴性对照组(13.26%±0.49%)和空载体对照组(12.41%±0.46%)，差异有统计学意义(t＝56.31，P＝0.000；t＝51.39，P＝0.000)。RNA干扰组细胞凋亡率(8.90%±0.48%)与阴性对照组(5.84%±0.21%)和空载体对照组(5.99%±0.37%)比较，差异均有统计学意义(t＝51.34，P＝0.000；t＝47.27，P＝0.000)。
结论S100A6基因参与肺腺癌细胞的增殖、浸润、细胞周期、细胞凋亡等生物学过程，与肿瘤发生、发展、转移等密切相关，有望作为肺腺癌诊断和治疗新的分子靶标。
其他文献
研究发现二甲双胍对多种恶性肿瘤的增殖均有显著抑制作用，提示二甲双胍的抗肿瘤作用。二甲双胍可减少肿瘤细胞氧的消耗，经转录及转录后机制抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的聚集，通过激活腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制HIF-1α的表达。
超过50%的微小RNA(miRNA)定位于肿瘤相关的基因组扩增区域或脆性位点，可具有癌基因或抑癌基因的功能。近年来研究显示，在人类胃癌、肺癌、卵巢癌等恶性肿瘤中miR-449表达降低，被认为是一个抑癌miRNA。miR-449表达异常可能与肿瘤的发生和发展过程密切相关，研究其功能及调控机制，可为肿瘤诊断、治疗和预后判断提供重要线索。
细胞核内组蛋白乙酰化与去乙酰化失衡可诱发肿瘤。组蛋白去乙酰化酶(HDAC)作用于组蛋白，使其去乙酰化，维系组蛋白乙酰化与去乙酰化的平衡状态，与癌相关基因转录表达、细胞增殖分化及细胞凋亡等过程密切相关。HDAC抑制剂目前是国内外研究的热点，已有十多种HDAC抑制剂用于治疗血液肿瘤和恶性实体瘤，表现出明显的抗肿瘤活性。
高迁移率蛋白A2(HMGA2)是一种非组蛋白染色质相关蛋白，其AT-钩结构能够特异性结合特定的DNA序列，主要功能是作为致癌基因和结构转录因子。HMGA2几乎在所有类型的恶性肿瘤中表达，与肿瘤的形成、发展以及不良预后密切相关。HMGA2在各个生物过程，包括细胞增殖、细胞周期、干细胞自我更新、上皮间质转化及DNA损伤修复中都起到了重要作用。深入研究高迁移率蛋白A2对肿瘤的影响及其作用机制具有重大意义
免疫衰老是指机体随着年龄增长而出现的免疫器官、免疫细胞等的结构与功能性衰退，导致免疫监视能力下降，从而引起肿瘤免疫逃逸发生，促使癌症的发生发展。机体固有免疫功能衰退表现在巨噬细胞和自然杀伤细胞对肿瘤细胞的直接清除作用减弱，树突状细胞的肿瘤抗原呈递能力下降；而获得性免疫功能的衰退主要表现在CD8＋ T细胞毒性的下降并分泌促肿瘤生长因子。干预免疫衰老可为临床肿瘤防治提供新思路。
电压门控钾离子通道Kv1.5广泛表达于多种类型肿瘤并参与肿瘤细胞增殖、凋亡、周期等过程。某些抗肿瘤药物可通过影响Kv1.5通道的表达进而影响肿瘤的生物进程。Kv1.5通道是肿瘤治疗的新靶点，研究Kv1.5通道可以进一步了解肿瘤细胞发生、发展的机制，并有助于研制出新的抗肿瘤药物，为肿瘤治疗提供新的更好的方法。
放疗作为鼻咽癌(NPC)的主要治疗方法已使其得到有效控制，但由于与鼻咽部解剖位置临近，放疗引起的口腔并发症非常普遍，口腔第二原发癌(SPM)已成为导致NPC患者最终生存率低的重要原因。SPM的发病机制尚未完全明确，患者预后较差，对其的研究仍在探索中。
婆罗双树样基因4(SALL4)在胚胎干细胞和肿瘤细胞的增殖、多能性维持方面发挥着重要作用。在完全分化的细胞中，SALL4基因的表达被沉默或者下调，而在多种非生殖细胞恶性肿瘤中SALL4基因被再次激活，表达上调，并且SALL4的表达水平常常与疾病的进程、治疗效果及预后相关。因此，SALL4的检测对于非生殖细胞恶性肿瘤的诊断以及病情监测具有重要意义。
浆细胞瘤转化迁移基因(PVT1)是一个重要的长非编码RNA，在人类基因组PVT1定位于染色体8q24.21。PVT1的异常表达和多态性与人类多种肿瘤如恶性淋巴瘤、乳腺癌、结直肠癌、胰腺癌等密切相关，并能影响肿瘤患者的生存和预后。目前认为其作用机制可能是通过与Myc基因、微小RNA或其他蛋白的相互作用，以及基因多态性等，但还不明确，对PVT1的深入研究有望为肿瘤的诊断治疗提供新靶点。
人口密集地区:平均氘浓度150ppmrn地球上生物体内的氘含量一般是由海水中的氘含量、以及雨和雪蒸发后的降水中的氘含量决定的.一般来讲,越接近极地,水中的氘含量越少,赤道附