重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究——Ⅰ.ELISA方法的初步建立及其标化

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinglink
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法.研究结果表明,重组抗原最适包被质量浓度为1 mg/L,最适包被条件为4C过夜,血清稀释度为1:40,待检血清和酶标二抗的反应时间分别为37C30 min和40 min,底物用TMB溶液,37C显色10 min.本研究对ELISA板的蛋白稳定剂、血清稀释液的显色系统和终止液进行了研究.用全病毒进行的阻断试验结果表明,全病毒能够阻断阳性血清与包被重组
其他文献
为了保障春耕农机化生产的顺利进行,使农民用上安全可靠、环保适用的农机产品,陕西省农机鉴定站认真贯彻落实省农机局2017年工作要点和农机化追赶超越工作方案,提早部署、统一安
将猪白介素4(Porcine interleukin4,PIL-4)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP~N1中,构建重组表达质粒pEGFP—PIL-4,利用脂质体法转染CHO-K1细胞,采用荧光显微镜实时观察、RT—PCR和West
为探讨内毒素血症时山羊肝线粒体一氧化氮(NO)及一氧化氮合成酶(NOS)的变化,将72只山羊随机分成6组,每组12只,分别为A组对照组、B组内毒素血症模型组(内毒素,LPS 1 mg/kg体质量)、C
6月初,安徽小麦主产区的田间地头,除了随处可见撒着欢儿大口"吃"进麦穗的收割机外,秸秆灭茬还田机和打捆机成为一道新的风景。今年为缓解环保压力,安徽秸秆禁烧力度空前,各式秸
根据GenBank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的核苷酸序列,设计并合成了扩增CDVH、F和N基因的3对引物,经RT—PCR分别扩增获得了CDV小熊猫株(LP株)H、F和N基因,并对H、F及N基因进行了克隆和
取单层培养36h生长良好的犊牛肝细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、50、100、200、500、1000ng/L的羊体外合成神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY),每个处理3个重复(每个重复2孔),再培养12h
72只泌乳期SD雌性大鼠随机均分成对照组和试验组(n=36),对照组于产后0h左后腿胫骨前肌内注射0.01 mol/L、pH7.2 PBS 100μL/只;试验组肌注CpG-DNA 200μg/只.产后72h经乳头管
以中国太湖猪胎儿成纤维细胞为核供体,以体外成熟卵母细胞为核受体,以杜洛克猪为代孕母猪,进行了太湖猪体细胞克隆技术的研究,成功地获得了首例体细胞克隆太湖猪仔猪。经微卫星DN
鸭瘟病毒(DPV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻3种途径免疫1日龄雏鸭,应用聚合酶链反应(PCR)检测了病毒在体内分布和排毒规律.Ch株免疫雏鸭后,时血液、心、肝、脾、肺、肾、十二
用RT-PCR的方法扩增水泡性口炎病毒G蛋白抗原决定基部分基因片段,构建克隆质粒pMD18-T-G660和表达质粒pET-28a-G660,转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,得到高效表达,表达蛋白质的相