【摘 要】
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目的克隆Kif1a启动子区基因全长序列,构建并鉴定Kif1a启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-Kif1a。方法以含Kif1a启动子基因全长序列的基因片段(2565 bp)的重组pGEM-T ea
【机 构】
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吉林大学第一医院神经内科和神经科学中心,吉林大学第二医院眼科中心眼底病科
【基金项目】
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国家自然科学基金(31872772),吉林省自然科学基金(省联合基金白求恩医学专项20200201606JC),吉林省卫生计生委科研计划(3D510P503428),2019年度吉林大学第一医院科技成果转化基金项目(JDYYZH-1902039),吉林省卫健委科技能力提升项目(2016J049)。
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目的克隆Kif1a启动子区基因全长序列,构建并鉴定Kif1a启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-Kif1a。方法以含Kif1a启动子基因全长序列的基因片段(2565 bp)的重组pGEM-T easy载体为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出Kif1a启动子基因全长序列1853 bp,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-basic,构建含正确目的基因的表达载体pGL3-Kif1a,行SacI和XhoI酶切、PCR及测序鉴定;并以该质粒转染小鼠SCG细胞进行活性检测。结果酶切、PCR及序列测定表明,克
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