氯胺酮对心肌缺血再灌注损伤中Toll样受体-4和核因子-κB表达的影响

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pandengwei
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目的 研究氯胺酮对心肌细胞H9c2缺血再灌注损伤的保护作用及对Toll样受体-4 (TLR-4) 和核因子-κB (NF-κB) 表达的影响.方法 将处于对数生长期的大鼠心肌H9c2细胞分为3组: 正常对照组(Con组)、缺氧复氧组 (I/R组)、缺氧复氧+氯胺酮组 (I/R+K组).各组细胞处理后采用细胞计数试剂盒 (CCK-8) 检测细胞增殖能力, 试剂盒检测细胞内活性氧 (ROS) 水平及细胞外乳酸脱氢酶 ( LDH) 含量, 流式细胞仪检测细胞凋亡情况, 实时荧光定量PCR ( RT-PCR) 检测TLR-4 mRNA水平. Western印迹检测TLR-4、 NF-κB及凋亡相关蛋白活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (Cleaved Caspase-3) 蛋白表达水平.结果 与Con组相比, I/R组细胞增殖能力显著降低, 细胞内ROS水平升高, 细胞漏出LDH含量增多, 细胞凋亡率显著增加, TLR-4和NF-κB表达水平明显上调, Caspase-3蛋白激活增多 ( P<0.05).与I/R组相比, I/R+K组细胞增殖能力明显升高, 细胞内ROS水平降低, 细胞漏出LDH含量减少, 细胞凋亡率显著降低, TLR-4和NF-κB表达水平下调, Caspase-3蛋白激活减少 (P<0.05).结论 氯胺酮能够通过抑制TLR-4和NF-κB的表达, 减轻细胞损伤, 减少细胞凋亡, 对心肌细胞缺血再灌注损伤起保护作用.
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