去甲基化对髓性白血病K562细胞增殖及蛋白表达的影响

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目的:研究去甲基化对人类髓性白血病K562细胞生长增殖及蛋白表达的影响,筛选去甲基化后K562细胞中的差异表达蛋白.方法:体外培养K562细胞后给予甲基化抑制剂5-杂氮脱氧胞苷处理,CCK-8试剂盒检测细胞抑制率,流式细胞术联合碘化丙啶(PI)染色进行细胞周期分析.采用双向凝胶电泳分离总蛋白质,PDQuest图像分析软件识别差异表达蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术鉴定差异表达蛋白质.结果:与对照组相比,甲基化抑制剂处理能显著抑制K562细胞的增殖(P<0.01),且使大多数细胞阻滞在G0/G1期.图像分析共识别了17个差异表达的蛋白质点,经质谱技术成功鉴定了10种蛋白质,其中8种蛋白质在去甲基化处理后下调,2种蛋白质上调.结论:本研究鉴定出了10个可能与髓性白血病甲基化相关的差异表达蛋白,为深入揭示白血病的发病机制以及寻找新治疗方法提供了理论依据.
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