两种核酸检测法在副溶血性弧菌耐热直接溶血素和不耐热溶血毒素中的应用评估

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目的比较CPA-核酸试纸条法与荧光定量PCR法检测副溶血性弧菌(VP)的tlh种特异性基因和tdh毒力基因的灵敏度与特异性。方法采用CPA-核酸试纸条法和荧光定量PCR法同时对655株不同来源的VP菌株进行tlh、tdh基因检测。结果 CPA-核酸试纸条法与荧光定量PCR法检测结果相同,VP菌株的tlh基因检测阳性率均为100%(655/655)。两种方法对tdh基因的检测结果也完全一致,tdh基因临床株与海产品株阳性检测率均分别为95.8%(207/216)与2.27%(10/439)。CPA-核酸试纸条法对tlh、tdh基因检测具有高度特异性,灵敏度可达6.2×103cfu/ml菌液,从核酸制备至完成检测最快仅需1 h。结论 VP临床株与涉水产品分离株普遍携带tlh种特异性基因,而tdh毒力基因主要存在于临床标本而在涉水产品株极少存在,可采用敏感、特异的CPA-核酸试纸条法,做VP腹泻患者的床边诊断以及食物中毒事故现场的快速检测。 OBJECTIVE: To compare the sensitivity and specificity of the tlh species-specific gene and the tdh virulence gene of Vibrio parahaemolyticus (VP) by CPA-nucleic acid test strip and fluorescence quantitative PCR. Methods The tLh and tdh genes of 655 VP strains from different sources were detected simultaneously by CPA-nucleic acid test strip method and fluorescence quantitative PCR method. Results The results of CPA-RNA test were the same as those of real-time PCR. The positive rate of tlh gene in VP strains was 100% (655/655). The two methods were also identical to the tdh gene test results. The positive rates of tdh gene clinical strains and marine strains were 95.8% (207/216) and 2.27% (10/439) respectively. CPA-nucleic acid test strip method for tlh, tdh gene test has a high degree of specificity, sensitivity up to 6.2 × 103cfu / ml bacterial liquid, from the preparation of nucleic acid to complete the test as soon as only 1 h. CONCLUSION: The isolates of VP clinical strains and wading products commonly carry tlh species-specific genes, while the tdh virulence genes are mainly found in clinical samples and are rarely present in wading products. Sensitive and specific CPA-nucleic acid test strips France, do bedside diagnosis of patients with VP diarrhea and rapid detection of food poisoning at the scene.
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