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目的研究荷叶铁线蕨抗菌水提醇沉液的最佳制备方法。方法采用正交设计试验法进行水提醇沉液工艺的用水量（A）、煎煮时间（B）、浓缩比例（C）、乙醇浓度（D）4因素3水平的实验研究,以其提取液对铜绿假单胞菌的药敏试验为指标判断抑菌效果,根据抑菌效果判断最佳制备方法。结果荷叶铁线蕨抗菌水提醇沉液的最佳制备条件为：煎煮用水量分别为生药量的6倍、4倍、4倍;煎煮时间分别为60、40、30 min;提取浓缩液为1.5∶1;醇沉液含醇量70%。结论筛选出了荷叶铁线蕨的最佳水提液制备方法。