【摘 要】
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目的构建人抑瘤素 M(OSM)的原核表达载体,通过表达及纯化获得重组蛋白,为深入研究 OSM 的功能及机制奠定基础。方法利用 PCR 技术,从质粒 pOTB7-hOSM 中扩增出人OSM 蛋白编码序列,
【机 构】
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中国医学科学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室
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目的构建人抑瘤素 M(OSM)的原核表达载体,通过表达及纯化获得重组蛋白,为深入研究 OSM 的功能及机制奠定基础。方法利用 PCR 技术,从质粒 pOTB7-hOSM 中扩增出人OSM 蛋白编码序列,与原核表达载体 pET-16b 连接,构建表达质粒 pET16b-OSM。在 BL21(DE3)工程菌中表达目的蛋白,Western blot 法检测 OSM 蛋白的表达。为提高OSM 的可溶性表达,采用共表达分子伴侣的方法提高其上清产物的表达量。将放大发酵的产物处理后,经镍亲和层析法纯化,获得 OSM 成
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