【摘 要】
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丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径.为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路
【机 构】
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东北农业大学资源与环境学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物支原体病研究室,吉林农业大学动物科学技术学院,东北农业大学动物医学学院
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丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是经典的细胞信号通路之一,主要包括JNK、P38、ERK 3条信号途径.为明确丝状支原体丝状亚种(Mmm)的脂质相关蛋白(LAMPs)是通过MAPK信号通路诱导胎牛肺细胞(EBL) IL-1β的分泌,本研究通过荧光定量PCR检测IL-1β的mRNA表达水平,结果显示LAMPs可以诱导EBL细胞分泌IL-1β,并确定Mmm的LAM Ps刺激EBL细胞的最佳时间为6h,最佳剂量为1 μg/mL;将JNK、P38及ERK抑制剂分别加入培养的EBL细胞后,IL-1β的mRNA表达水平均受到显著抑制(p＜0.05);将pCMV-HA-TLR2转染EBL细胞使其过表达和抗体封闭TLR2两种方式处理,并采用JNK、P38及ERK抑制剂分别处理EBL细胞,经检测过表达TLR2实验组的IL-1β mRNA表达水平上调,然而抗体封闭TLR2实验组的IL-1β mRNA表达水平下调,表明TLR2通过MAPK信号通路对IL-1β的分泌进行调控;采用牛IL-1β的ELISA试剂盒对细胞上清液中IL-1β浓度的检测结果显示,其与IL-1β的mRNA表达水平变化趋势一致.上述结果表明Mmm的LAMPs可以诱导EBL细胞,激活TLR2依赖的MAPK信号通路,从而引起IL-1β的分泌.
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