二亚硝基哌嗪上调HSP70-2促进鼻咽癌细胞转移

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目的:探讨二亚硝基哌嗪(dinitrosopiperazine,DNP)通过调控热休克蛋白70-2(heat shock protein70-2,HSP70-2)表达参与鼻咽癌转移的分子作用机制。方法:以具有低转移潜能的鼻咽癌细胞6-10B作为研究材料,应用MTT法检测DNP对6-10B细胞的非毒性浓度;分别采用间接免疫荧光法、蛋白质印迹法和实时荧光定量-PCR法检测DNP对6-10B细胞中HSP70-2表达的影响;采用特异性针对HSP70-2基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)-HSP70-2沉默HSP70-2的表达,并用Transwell小室法检测DNP对细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:DNP对6-10B细胞的非毒性浓度为0~100μmol/L:DNP(100μmol/L)处理6-10B细胞后,HSP70-2蛋白表达明显上调,且以在细胞质中表达为主;不同浓度DNP(50和100μmol/L)处理6-10B细胞后,HSP70-2蛋白的表达水平呈浓度依赖性(P<0.05);DNP(50和100μmol/L)处理组中HSP70-2 mRNA的相对表达量分别为0.81±0.14和0.81±0.26,同空白对照组的1.04±0.33比较,差异无统计学意义(P>0.05)。siRNA-HSP70-2沉默6-10B细胞中HSP70-2蛋白的表达可抑制DNP诱导的6-10B细胞的侵袭及迁移能力。结论:DNP可能通过转录后调控机制上调HSP70-2表达,参与鼻咽癌细胞的侵袭和转移。
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