抗突变型p53 Maxizyme的体外转录和真核表达载体的构建及鉴定

来源 :郧阳医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sea0075
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目的:构建抗突变型p53 Maxizyme(Mz)的体外转录和真核表达载体,为进一步探讨抗p53 Mz的体外切割作用和在细胞内对突变型p53的抑制作用打下了基础.方法:应用计算机设计针对肝癌细胞突变型p53(mtp53)249位密码子的Mz的基因片断(MzL和MzR),分别克隆入体外转录载体pBSKU6中,命名为pU6-MzL和pU6MzR.应用PCR技术使pU6-MzR的酶切位点改变,亚克隆入pU6-MzL中,重组质粒命名为pU6-Mz,同时构建靶基因mtp53的体外转录质粒.再将嵌U6中的Mz亚克隆入
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