【摘 要】
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目的探讨肝细胞大规模培养的简便方法.方法采用改良Seglen原位两步胶原酶灌注法分离乳猪肝细胞,将肝细胞悬液接种到预先用1%多聚赖氨酸被覆的培养瓶中,置于37℃普通培养箱低
【机 构】
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南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科,南京大学生化系
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目的探讨肝细胞大规模培养的简便方法.方法采用改良Seglen原位两步胶原酶灌注法分离乳猪肝细胞,将肝细胞悬液接种到预先用1%多聚赖氨酸被覆的培养瓶中,置于37℃普通培养箱低速旋转培养,定期测定其活率、葡萄糖合成功能、G-6-Pase活性及上清中白蛋白、LDH浓度,电镜观察培养细胞的超微结构.结果旋转培养肝细胞保持较高的活率,葡萄糖合成功能和G-6-Pase活性明显增高;电镜下肝细胞形成紧密连接和胆小管样结构.结论采用普通培养箱旋转培养能保持良好的肝细胞功能,本研究为人工肝的临床应用提供了简便的大规模培养方
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