人跨膜蛋白39A原核表达载体构建、条件优化及可溶性表达

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户：littlev19

【摘要】

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目的构建人跨膜蛋白39A基因(TMEM39A)的原核表达载体,优化表达条件并获得可溶性表达的TMEM39A。方法以HEK293细胞的总RNA为模板,反转录PCR扩增TMEM39A,构建其原核表达载体pGE

【作者】

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李向茸马瑞仙李倩王兴陇李生军张海霞冯

【机构】

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西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室,西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞技术创新中心,西北民族大学生命科学与工程学院

【出处】

：

基础医学与临床

【发表日期】

：

2019年7期

【关键词】

：

跨膜蛋白39A 条件优化融合蛋白可溶性表达

【基金项目】

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国家自然科学基金(31460665);教育部“创新团队发展计划”(IRT_17R88);西北民族大学“双一流”引导专项生物工程特色学科(10018703,1001070204)

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目的构建人跨膜蛋白39A基因(TMEM39A)的原核表达载体,优化表达条件并获得可溶性表达的TMEM39A。方法以HEK293细胞的总RNA为模板,反转录PCR扩增TMEM39A,构建其原核表达载体pGEX-6P-1-TMEM39A,并在不同温度、IPTG浓度、A600nm值及时间条件进行诱导表达,然后利用上述获得的最佳诱导条件进行大量表达,分析其可溶性和抗原性。结果重组表达载体pGEX-6P-1-TMEM39A与GenBank中的TMEM39A(登录号:BC021277.2)的核苷酸序列同源性为99.9

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