【摘 要】
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目的 :构建并表达含有SARS冠状病毒RNA片断的抗核糖核酸酶的病毒样颗粒 .方法 :通过克隆大肠杆菌噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因以及SARS冠状病毒RNA聚合酶基因片段 ,将这
【机 构】
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目的 :构建并表达含有SARS冠状病毒RNA片断的抗核糖核酸酶的病毒样颗粒 .方法 :通过克隆大肠杆菌噬菌体MS2的装配蛋白和壳蛋白基因以及SARS冠状病毒RNA聚合酶基因片段 ,将这些基因连接到载体pTrc99a上表达 ,并进行纯化、定量分析、RT PCR检测和稳定性试验 .结果 :获得病毒样核蛋白颗粒 ,在 37℃稳定性可达到 30d ,能抵抗核糖核酸酶降解 .结论 :该病毒样核蛋白颗粒稳定、安全、可靠 ,可作为SARS冠状病毒RT PCR检测、定量分析的有效阳性参考品 .
Objective: To construct and express anti-ribonuclease-like virus-like particles containing RNA fragments of SARS coronavirus.Methods: These genes were cloned by cloning the assembly protein and capsid gene of Escherichia coli phage MS2 and the RNA polymerase gene of SARS coronavirus And then purified and quantitatively analyzed by RT PCR and stability test.RESULTS: The virus-like nucleoprotein particles were obtained and their stability reached 37 days at 37 ℃, which could resist the degradation of ribonuclease.Conclusion: The virus The NP-like particles are stable, safe and reliable and can be used as effective positive reference materials for the detection and quantitative analysis of SARS-CoV by RT-PCR.
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